选购PCR仪，一招来搞定！

问：网上购物技巧有哪些？

答：一看店家信誉，二看好评率，三看实拍，四看销量，五下单！

那么，购买一台PCR仪，需要几步呢？

这可并不是个轻松的差事，市场上有那么多种仪器可以选择，光是比较参数，就够累了。况且PCR仪还是实验室中的老黄牛，几乎24小时运转，买台可靠的仪器尤为重要。一想到这儿，是不是更感觉压力山大。

在签下订单前，也许你该考虑以下五个方面。

一、终点、定量还是数字？

如今的PCR仪器主要分为三大类：标准PCR（终点PCR）、实时定量PCR（qPCR）以及数字PCR（dPCR）。前两者大家都很熟悉，而后者是这两年冉冉升起的新星。

标准PCR仪主要是产生大量的核酸序列供后续实验使用，比如测序、克隆，或仅仅是为了在凝胶上看看有没有合适的条带。

qPCR则是实时定量靶序列，通常被用来测定生物分子的丰度，而不是生成终产物。“有了qPCR，研究人员就不再关心PCR产物发生了什么。他们的问题是：开始时有什么？突变是否存在？”罗氏的技术服务科学家Joe Donnenhoffer谈道。

数字PCR也是定量的，但并非实时。反应发生在大量的微小分区中。这些分区很小，其中每个可能包含0或1个DNA分子。通过计算阳性反应的数量，研究人员能够真正定量DNA。这比qPCR更为灵敏，也不需要标准曲线。

对于标准PCR仪和定量PCR仪之间的选择，研究人员通常都心里有数。不过，说到qPCR和dPCR之间的选择，研究人员就没那么有把握了，有时也需要帮助。据Bio-Rad的高级营销经理Viresh Patel介绍，这个选择通常取决于研究人员的应用和他们想要回答的问题。“当我们听到拷贝数分析或突变检测时，数字PCR通常能提供一个更好的答案，更明确的答案，”Patel说。不过对于高通量应用，qPCR则更实际。

CFX96 Touch™ 荧光定量 PCR 检测系统

二、样品形式

大多数用户以96孔形式运行PCR反应，通常使用0.2 ml PCR管。当然也还有其他形式，适合更高的通量或不同的样品量，如0.5 ml管。比比科技（Bibby Scientific）的Prime仪器允许不同大小的PCR管插在同一模块上。当同一实验室中的不同人在进行不同的PCR检测时，这特别有用。

尽管一些PCR仪有着固定的样品模块，但很多都是可以互换的。在购买之前，我们应充分考虑未来的计划。“研究人员应避免有那种‘我们一直都用这种’的心态，考虑一下96孔模块以外的形式，”Streck的产品经理Nicole Quackenbush谈道。

一些PCR仪允许样品模块更换成两个或多个更小的模块。这种模块化的系统就好像多台热循环仪一样，能提高效率。Veriti PCR仪专利的技术可同时运行6种不同退火温度的PCR程序，配有6个独立的Peltier加热块，使您可以在6个温度区间内进行精确的控制，比传统的梯度PCR更有效的优化反应条件。这种设计带来了灵活性，也明显缩短了优化时间。

[Veriti PCR仪]

除了模块式的PCR之外，你还有另一个选择，那就是转子式的PCR仪，它通过加热周围的空气而控制温度。QIAGEN仪器业务的主管Carola Schade解释道：“转子式的系统就像一个烤箱。这种形式能实现明显更快的加热和冷却循环，以及更精确地达到特定温度。”

三、通量

目前最普遍的配置是标准的96孔模块形式。不过，市场上也有更高的通量，比如384孔或1536孔的形式。

罗氏的Donnenhoffer鼓励客户考虑他们目前的通量需求，以及5-10年后可能的通量需求。罗氏的LightCycler® 1536系统能够在1小时内同时处理1536个样品。

其他系统，比如Bio-Rad的CFX384 Touch™实时定量PCR系统，也利用384孔形式，但增加了自动化转板的优势。据介绍，有了这个384孔的系统及自动化，你每天可运行20块板。

一般来说，数字PCR的通量有限。Bio-Rad的QX200™微滴式数字PCR系统带有96孔。这种方法的主要优势在于更高的灵敏度和辨别力。若是需要高通量的工作，还是考虑qPCR吧。

[Bio-Rad QX200™ Droplet Digital™ PCR 系统]

四、便携性

一些PCR仪器是专为便携性而设计的，让研究人员、调查人员和军事人员能够在现场或者实验室外检测特定的遗传材料。但在大多数情况下，仪器始终是摆在拥挤的实验室工作台上，这意味着体积小只是一个附加值。

PCR仪需要某些共同的组件来维持正常功能，比如加热元件、电源和触摸屏。“因此，高性能的热循环仪具有一定的最小体积。小型化始终被限制在某种程度。”

五、用户体验

简单易用这也很关键，不仅有利于正常运转，还能减少错误。PCR新手可能会发现如今的触摸屏仪器使用很简单。不过，高级用户可能一时还难以适应从一个PCR品牌到另一个的转换，因为他们已经习惯了特定的界面。

软件界面对仪器的使用和整体用户体验而言至关重要，特别是对于诊断实验室。远程访问也增强了用户体验，它让用户能够调整操作并查看初步结果，而这一切都在智能手机或平板电脑上进行。

Donnenhoffer认为，经验丰富的研究人员通常关注两个关键参数：速度和准确性。不过，对于新手而言，速度是次要的。“在一天结束的时候，你依赖的还是准确性，”他说。

不过，还有一种更快捷的方式，只需一招，教你选对适合自己的PCR仪，你要不要听？

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