P.293 消毒：杀死或减少微生物数量的过程

1. 防腐：抑制细菌生长繁殖，一般不死亡
2. 消毒：杀死常见微生物，不一定杀死芽孢。一般消毒剂常用浓度只对细菌繁殖体有效。提高浓度延长时间对付芽孢
3. 灭菌：物理&化学方法，杀灭所有微生物。包括：细菌繁殖体、芽孢、真菌、病毒及非病原微生物。

消毒剂：化学药物，要求能够杀灭微生物繁殖体。不同于抗生素，不具有选择性。
无菌操作：使用经过灭菌的器材，避免细菌进入人体&污染目的物的操作技术。

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消毒方法：物理&化学

物理：热力、紫外线、辐射、超声波、滤过、干燥、低温。

• 热力灭菌法

  1. 干热灭菌法
     杀菌作用是通过脱水干燥、大分子变性。
     灭菌机制是菌体蛋白质变性、电解质浓缩引起中毒
  • 干燥状态下80~100℃、1 h。
  • 芽孢 160~170℃、2 h。
    方法包括：焚烧法（彻底）、烧灼法、干烤法（玻璃、瓷器、需干燥的注射器）、红外线--属于热力灭菌（医疗器械）
  2. 湿热灭菌法（效力更大、最常用）
  3. 菌体吸收水分，蛋白质较易凝固。
  4. 穿透力好，传导热能效率远高于空气
  5. 蒸汽有潜热，1 g水 2213 J / 529 cal，迅速提高温度。

  湿热杀菌机制

  1. 使菌体蛋白质变性
  2. 使细菌核酸降解
  3. 使细菌胞浆膜损伤

  煮沸法：100℃ 5分钟 杀死繁殖体，一般煮沸10分钟，芽孢需1~3 h。(1%~2%碳酸氢钠，沸点105℃，可以防锈 )
  流动蒸汽灭菌法（常压蒸汽灭菌法）：100℃水蒸气、15~30分钟杀死繁殖体。
  间歇蒸汽灭菌法：杀死所有细菌所有繁殖体和芽孢！也适用于不耐热的培养基。
  高压蒸汽灭菌法：效果最好，应用最广。103.4 kPa（1.05kg/cm2）、121.3℃、15~20分钟。培养基、生理盐水、器械、注射器等。
  巴氏消毒法：牛奶&酒类。杀死病原菌、一般杂菌。61.1_{62.8℃、30分钟；71.7℃、15}30秒。

• 辐射杀菌法

  • 紫外线：曝晒数小时。低压水银蒸汽灯、紫外线灯，不能透过玻璃、纸张，只适用于空气&物表。240~280 nm有效，260 nm最强。
  • 微波：按模拟题，属于电磁辐射
  • 电离射线：破坏核酸、蛋白质、酶系统，致死效应。X射线、γ射线、阴极射线。塑料物品、食品、药品、注射器、毛皮等。

• 滤过除菌法
  液体&空气。获得无菌液体&空气。不耐高温的血清、毒素、抗生素、药液、空气。
  不能除去病毒、支原体、L型细菌

  • 蔡氏滤菌器(石棉板)
  • 玻璃滤菌器
  • 薄膜滤菌器

• 超声波杀菌法
  裂解多数细菌，G-更敏感。主要用于粉碎细胞。
  机制：通过水时发生空腔化作用。

• 干燥与低温抑菌法

  • 干燥时很快死亡（脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、霍乱弧菌）
  • 抗干燥能力较强（溶血性链球菌25天，结核分枝杆菌数月）炭疽芽孢耐干燥20多年。

  干燥法常用于保存食物，浓盐/糖渍→细菌体内水分散失-生理性干燥-生命活动停止→防变质。
  低温：细菌新陈代谢减慢，保存菌种。
  冷冻真空干燥法：避免解冻时损伤细菌→低温真空抽去水分。(冻干 )

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化学消毒法

化学消毒剂：杀菌作用、化学药品。
防腐剂：抑制微生物生长繁殖、化学药品。
杀菌机制不同分类

1. 促进蛋白质变性、凝固：酚类（高浓度）、醇类、重金属盐类（高浓度）、酸碱类、醛类（烷化剂）
2. 干扰酶系统和代谢：氧化剂、重金属盐类（低浓度）。细菌的-SH基结合，酶失活。
3. 损伤细胞膜：酚类（低浓度）、表面活性剂、脂溶剂。细菌破裂

• 酚类：苯酚（石炭酸）、煤酚皂溶液（来苏尔）、氯已定!（洗必泰），
  低度→破坏细胞膜，胞内容物漏出；高度→蛋白质凝固
• 醇类：去除细菌胞膜中脂类、使蛋白质变性。
  乙醇-最常用，70%~75%。（高浓度）使表面蛋白质迅速凝固，效力反而降低。
• 重金属盐类
  • 低度→结合-SH基，酶蛋白失活。
  • 高度→与带-电荷蛋白质结合，蛋白变性、沉淀。
• 氧化剂
  过氧化氢、过氧乙酸、高锰酸钾、卤素。
  杀菌机制：氧化。过氧乙酸-强氧化剂。
  应用广泛、金属器具除外→繁殖体、芽孢、真菌、病毒均有效。
  卤素（碘--皮肤、氯--水：漂白粉、次氯酸钙、次氯酸钠）
• 表面活性剂：新洁尔灭（苯扎溴铵......）
• 烷化剂：甲醛、环氧乙烷、戊二醛。
  杀菌机制--对细菌蛋白质&核酸的烷化作用。
  • 优点：广谱，杀菌力强。
  • 缺点：人体毒性、致癌。

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影响因素

1. 消毒剂的性质、浓度、作用时间。浓度一定，作用时间↑，效果↑。
2. 微生物种类、数量。
   一般消毒剂对结核分枝杆菌作用差
   70%乙醇不能杀灭芽孢。微生物数量↑，时间↑
3. 温度：温度↑，效果↑
4. 酸碱度：戊二醛本身中性，水溶液弱酸性→芽孢无效
5. 有机物：环境中存在有机物影响效果。