cibersortx怎么用_【搬砖】Cibersort p-value含义

使用cibersort对不同的GSE文件进行免疫细胞类别计算,发现得出的p-value各不相同,有的全是0,有的(0,1)之中散在分布。。。不确定计算得到的结果是否可靠,因此有必要明确p-value的含义~

example1

example2:p-value全为0

那么现在只剩下p值了,p值是怎么算的呢?

使用置换检验。

就是用蒙特卡罗方法,不断地从原来的数据中跟单个样本等长的数据,模拟新样本,进行CoreAlg计算。

每次抽取出相关性系数r,当次数足够多的时候,就形成背景相关性系数分布。

参考:http://www.sci666.net/56744.html

根据楼主的意思,cibersort函数内部使用的“置换检验”是关键,那么理解成每一个样本的计算其实需要参考整体样本,那么不同类别的(比如,bone metastasis/lung metastasis/primary)样本需要分别来计算的。(而我之前是把所有混在一起计算的)

我强行解释一波,每次真正的样本计算出来的r值,找到其在背景分布的位置,然后看右边红色的概率有多大。如果小于0.05,说明产生这种极端值并不是偶然的。

那么该样本的反卷积解析就是成功的,可信的。

参考:http://www.sci666.net/56744.html

p值小于0.05,说明产生「极端值」不是偶然的。

提取同一source(lymph node)的samples进行计算

(默认perm=1000)p值多>0.05,good?

可视化

上图可见Mast cell activated、NK cells activated等immune cell在不同样本中组成成分有较大不同……解释了为啥p-value会小于0.05。说明这批samples中的免疫浸润存在较大异质性。【存疑

接下来,改变置换次数,观察结果的差异。

使用上面同一个matrix。

perm=0,p-value=999(震惊!

perm=10

perm=100

迷糊了,最直接的问题:p-value<0.05好还是 >0.05好呢?

在cibersort用example data验证:Example job: Original Abbas et al. mixtures microarray (GSE11103)

https://cibersortx.stanford.edu/runcibersortx.php

得到的p-value均为0,这批样本有4类,差异较明显。

小结

p-value与perm置换次数、样本的异质性有关。

当p-value<0.05,说明存在异质性,最极端是p-value全为0.

当p-value全部大于0.05,说明这批样本的免疫细胞浸润无统计学差异。

end

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