细胞核酸提取产率高吗?

◎操作简便快速,可在20分钟内完成提取过程;

◎提取核酸纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.75-1.95;

◎产率高,同样的样本量提取的核酸量更多;

◎标本范围宽,适合于各种培养细胞、针刺吸取物、尿沉渣细胞等细胞离散标本

产品介绍

BIOG NA CeLL Kit是专门用于从各种细胞样本中提取基因组DNA和RNA的试剂盒。提取的样本范围包括各种培养细胞、针刺吸取物、尿沉渣细胞等细胞离散标本。BIOG NA CeLL Kit采用复合消化液消化细胞中的蛋白质,使核酸更容易释放出来,因而本试剂盒核酸提取产率较高。BIOG NA CeLL Kit采用了最新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方,提取得到的核酸纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于核酸杂交、PCR、RT-PCR、定量PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。

操作步骤:

1. 请自行准备:无水乙醇、去RNA酶PBS或生理盐水及1.5mL离心管。

2. 取出洗涤液,按70%比例加入无水乙醇, 9mL加入21mL无水乙醇,18mL加入42mL无水乙醇,混匀。

3. 细胞处理:a) 培养的贴壁细胞,先用胰酶消化,处理为细胞悬液,转移至1.5ml离心管,1,000 rpm 离心 5分钟,彻底弃去上清,

加入100μL PBS振荡至细胞悬浮;

b) 培养的悬浮细胞,转移至1.5ml离心管,1,000 rpm 离心 5分钟,彻底弃去上清,加入100μL PBS振荡至细胞悬浮。

4. 加入200μL裂解液,20μL消化液,振荡混匀,56℃温育10 分钟至细胞完全裂解。

5. 加入350 μL无水乙醇,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响核酸的提取与后续实验。

6. 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,静置2 分钟,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。

7. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液至吸附柱内,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。

8. 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,离去残留的洗涤液。

9. 取出吸附柱,放入新的1.5 mL 离心管内,加入50-100 μL 洗脱液,静置2分钟,12,000 rpm 4℃ 离心1分钟,收集核酸溶液。提取的核酸即可用于下一步实验或-70℃保存。

注意事项:

1. 裂解液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。

2. 本试剂可用于DNA提取,也可用于RNA提取,试剂盒内液体已经去RNA酶处理,但如用于RNA提取,实验所用器具也应除去RNA酶,实验过程中最好戴一次性洁净手套、口罩,提取的RNA溶液可适当加入RNA保护因子(货号:51090,一般50μLRNA溶液加入2μL。)

3. 所用细胞量建议不高于107,洗涤液在使用前请加入无水乙醇后充分混匀。

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