生物学实验方法及原理应用

1.Chromatin immunoprecipitation (ChIP)染色质免疫沉淀法

研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。

基本原理：生理状态下细胞内的蛋白质和DNA交联在一起，超声波将其打碎为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过所要研究的目的蛋白特异性抗体沉淀此复合体，特异性的富集目的蛋白结合的DNA片段。

2.yeast one-hybrid assays酵母单杂交实验

根据报道基因的表达情况，便能筛选出与靶元件有特异性结合区域的蛋白。

3.yeast two-hybrid 酵母单杂交实验

酵母转录因子 GAL4有（DNA结合域BD和转录激活域AD）二者充分接近可启动下游基因得到转录。BD和X蛋白结合，AD和Y蛋白结合，检测XY之间是否存在相互作用。

4.bimolecular fluorescence complementation assays双分子荧光互补实验

荧光蛋白在某些特定的位点切开，形成不发荧光的N和C端2个多肽分别连接到目标蛋白上，若相互作用，发荧光。若不，则不发荧光。

5.gas chromatography-selected reaction monitoring mass spectrometry(GC-MS)气相色谱-质谱联用方法