移液器使用规范

1、安装枪头
在将枪头(pipette tips)套上移液枪时,很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下,这时错误的做法,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道(如8道或12道)移液枪,则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。

2、量程设定
操作之前请先选择正确的移液器,移液器可在10~100%量程范围内操作,但在10%量程处操作对于移液技巧要求高,故推荐在35~100%量程范围内操作。
量程调节:当由小量程调节至大量程时,朝所需量程方向连贯旋转,旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小量程时,直接连贯旋转至所需量程。

3、润洗
粘稠液体可以通过吸头预润湿的方式来达到精确移液,先吸入样液,打出, 吸头内壁会吸附一层液体,使表面吸附达到饱和,然后再吸入样液,最后打 出液体的体积会很精确。
用同一样品重复吸液排液二至三次,润洗为以后每次吸液提供相同的接触面,保证操作的一致性。对常温样品,吸头润洗有助于提高准确性;但是对于高温或低温样品,吸头润洗反而降低操作准确性,请使用者特别注意。

4、吸头浸入角度
吸液时尽量保持垂直状态,倾斜角度不能超过20°


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5、吸头浸入深度

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6、吸头浸入时间
吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开,这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。
7、吸液速度
匀速连贯移液,控制好移液速度,太快会造成喷液,液体或者气雾冲入移液器内部,污染活塞等部件。
8、排液及吹液
先将活塞按至第一档排液,略作停顿后按至第二档进行吹液。
排液四种方式:

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9、手温
移液器不宜长时间握在手里,不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。

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移液枪使用诀窍
1、影响移液枪精度因素
(1)温度:室温低时,手温较高,使得空气膨胀,吸入冷溶液时往往发生误差; (2)气密性:tip和枪体的结合部,以及枪内柱体之间的长期磨损,造成误差;
(3)吸速:容易造成tip内气泡产生,而且会污染枪头;
(4)试剂的挥发:吸挥发性高的试剂时,蒸汽进入枪头,内压增高,结果在压出液体时,压力变大,而产生误差;
解决办法:反复抽吸4~5次就可改善。
2、使用注意事项
(1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气;
(2)为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为,吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小而产生误差;
(3)浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定;
(4)可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL蒸馏水20℃时重0.9982g;
(5)移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的,长期操作会使内部零件松散而损坏移液器;
(6)移液器未装吸头时,切莫移液;
(7)在设置量程时,请注意,旋转到所需量程,数字清楚显示在窗中,所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程,否则,会卡住机械装置,损坏移液器。
(8)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如,浓酸、浓碱、有机物等)。
(9)严禁使用移液器吹打混匀液体。
(10)不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度。同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液体,请使用移液管进行操作。
移液器的自行检测
移液器在使用过程中,如果怀疑其精确度,可根据以下提示自行检测:
怀疑一:移液器是否有漏气?
1、自行检测:目视法检测:将吸取液体后的移液器垂直静置15秒,观察是否有液滴缓慢的流出。若有流出,说明有漏气现象。压力泵检测:使用专用的压力泵,检测压力情况,判断是否漏气。
2、 可能的原因:
(1)吸头是否匹配?—— 使用原装匹配的吸头
(2)装配吸头时有无上紧?
(3)移液器内部气密性不好?
怀疑二:液体、移液器、吸头以及环境的温度差异是否会影响移液器的准确度?
移取液体的温度与吸头和移液器的温度不一致的情况下,液体温度高于吸头的,移取的液体体积会偏大,液体温度低于吸头的,移取的液体体积会偏小。
怀疑三:液体样品的密度和水是否有非常明显的区别?
大部分移液器出厂前的校准是用水作为标准液进行测试的,如果所操作的液体与水的比重有很大差异,所给出的不精确度和不准确度就不能满足,从而产生误差。
怀疑四:吸液速度太快,是否会导致移液体积不准确?
吸液速度太快会产生反冲和气泡,导致移液体积不准确。
ps:移液器长时间不用时建议将刻度调至最大量程,让弹簧恢复原形,延长移液器的使用寿命。
移液器错误操作及处理方法
错误:吸液时,移液器倾斜吸液;正确:垂直吸液;
分析:倾斜的状态会造成气压面的改变。会对移液精度造成影响;
错误:用大量程的移液器移取小体积的液体;
正确:移液体积需保证在移液器所提供的量程范围之内才符合不准确度和不精确度的要求;
分析:因为空气垫的存在,是造成移液器不准确度的主要原因。移液器的选择应该是最大量程,最接近目的液体转移量的选型原则;
错误:吸液速度和放液速度过快;
正确:慢吸慢放;
分析:快吸对于1mL及以上量程的移液器,很容易造成液体上冲,过快的放液会增加液体的残留量。

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