14.菌物的分离纯化和培养

分离的目的是为了明确病原物的类别。

分离材料的选择：

选择症状典型，材料新鲜，病健交界处的组织
分离材料的预处理

必要的流水冲洗；

若材料腐败沾染大量腐生菌，可采用先接种再分离的方式。
分离材料的表面消毒
合适的方式：分离-培养。

常用的表面消毒剂

0.1%升汞溶液，升汞具有一定的毒性，现在使用较少。
2%-5%次氯酸钠溶液
75%乙醇浓度并不是越高越好，乙醇消毒的原理是通过凝固细胞内的蛋白质对其灭活，75%消毒时，病原菌不能形成保护膜，乙醇分子得以进入病原菌内部而杀菌；95%能将病原菌表面的蛋白迅速凝固，形成保护膜，从而阻止乙醇分子进入杀菌。

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特殊分离方法都是选择性富集待分离的病原菌物。

14.6 菌物的纯化

培养基添加抗生素，如链霉素可以抑制大部分细菌，青霉素抑制革兰氏阳性细菌。
获得纯培养物。单孢分离法直接挑取法；振落法；梯度稀释法。

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14.8 菌物的主要性状特征

14.8.1 丝状菌物的菌落特征

菌落形态较大；
表面：干燥、不透明；
与培养基结合程度：较牢固、不易挑起；
颜色：多样(可呈现红、黄、绿、青绿、青灰、黑、白、灰等多种颜色)，正反面颜色不同；
质地：疏松，呈绒毛状、棉絮状、蛛丝网状；
气味：霉味。

14.8.2 丝状菌物液体培养的特征

震荡培养，菌丝缠绕成菌丝球，菌丝球或悬浮在培养液中，或沉于培养液底部。
静止培养，在液体表面生长，形成菌膜。

14.8.3 酵母菌的菌落特征

大多数与细菌菌落相似，表面湿润、粘稠、易挑取，但比细菌菌落大而厚；
颜色：多为白色，少数为红色；
质地：均匀，正反面和边缘，中央部位的颜色均一；
若培养时间太长，表面可产生皱褶；
具有一定的透明度；
气味：有悦人的酒香味。

14.8.4 酵母菌液体培养的特征

在液体培养基中，不同酵母菌生长的情况不同；
好气性酵母可在培养基表面形成菌膜，其厚度因种而异；
有的酵母菌在生长过程中始终沉淀在培养基底部；
有的酵母菌在培养基中均匀生长，使培养基呈浑浊状态。

15.菌物的分类和命名

15.1 生物的分类单元

域 domain
界 kingdom
门 phylum(division)
- 亚门 (subdivision)
纲 class
- 亚纲(subclass)
目 order
- 亚目(suborder)
科 family
- 亚科(subfamily)
属 genus
种 species

15.2 “种”以下的分类单元

变种种以下具有一定形态差异的类群，例如 Gaeumannomyces graminis(禾顶囊壳菌) var.tritici[小麦变种] G.graminis var.avenae[燕麦变种]
转化型
生理小种

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15.3 菌物的命名

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拉丁文的书写规则规定：

属名在前，种名在后；
属名和种名都需要用斜体书写，而命名人的姓用直体书写；
属名的首字母要大写；
手写菌物的学名时，应用下划线表示斜体，印刷时直接选用斜体即可。

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16.菌物的分类鉴定技术

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17. 植物病原菌物的主要特征

17.1 生活方式

植物病原物都是寄生物，根据生活方式分为：

活体营养
半活体营养
兼性腐生
兼性寄生

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17.2 侵染器官

附着胞、侵染钉：是主要侵染器官，由孢子萌发产生，可直接侵入寄主植物；
菌丝：可从自然伤口或伤口侵入。

附着胞如果直接由植物的孔口进入，就不需要形成侵染钉再侵入。

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17.3 侵入途径

直接侵入：直接穿透植物角质层和细胞壁；分生孢子，附着胞，侵染钉
自然孔口侵入：气孔，皮孔，水孔，柱头，蜜腺等；
伤口侵入：各类伤口。昆虫、线虫等。

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18.壶菌门和接合菌门代表属

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根霉属和毛霉属的比较

属	匍匐菌丝	假根	孢囊梗分枝
根霉属	有	有	无
毛霉属	无	有	有的有分枝

19.子囊菌门真菌-外囊菌和白粉菌类

外囊菌侵染，造成桃缩叶病。

外囊菌的由来：外囊菌属于子囊菌门，而子囊菌门中绝大多数真菌的子囊孢子都产生于子囊果内。但是外囊菌比较特殊，外囊菌所形成的子囊，不产生于子囊果内，而是排列在寄主植物细胞的表面，故称为外囊

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白粉菌属真菌主要引起葡萄白粉病，侵染部位包括叶片和果实。

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将布氏白粉菌属从白粉菌属分离出来的原因：白粉菌属真菌中闭囊壳附属丝非常短小，而布氏较大。

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20.子囊菌门真菌-赤霉属、顶囊壳属和黑星菌属

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三、顶囊壳属(Gaeumanomyces)

引起小麦全蚀病，根部和茎基部出现黑色。

四、黑星菌属

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【基础知识】植物病原真菌的分离、命名和分类