单核细胞增生李斯特氏菌对冰山生菜的侵染行为

一、文献简介

        

1.1 Title，期刊，作者

1.2 分区：Q1

1.3 IF：6.475

1.4 文献类型：期刊

1.5 Abstract：生菜很容易受到食源性病原体的污染，对食品微生物安全构成威胁。单核细胞增生李斯特菌（L. monocytogenes）是一种高致死性病原体，可以在叶菜上生存和增殖。本文研究了单核细胞增多症李斯特菌在冰山生菜上的污染阶段、附着部位、内化途径、增殖过程、细胞外物质分泌和毒力因子表达。结果表明，单核细胞增生菌在冰山生菜上的污染阶段为0-20分钟，增殖阶段为20分钟后。附着组织为气孔和皱纹。单胞菌在中脉的内化距离比在叶片的内化距离要远。它们通过上调flaA和motA基因的表达增强了细胞的运动能力，通过上调actA和inla基因的表达增强了细胞的粘附能力，有利于增殖的进行。在增殖过程中，细胞逐渐分泌细胞外物质，促进冰山莴苣上生物膜的形成。生物膜的形成经历了：单个细菌、细胞聚集和生物膜的成熟。生物膜更有可能在冰山莴苣的叶片上形成。

1.6 Keywords:单核细胞增多性李斯特菌,冰山生菜,感染行为,感官质量

二、Materials and methods

内化距离实验方案：从浸泡部分依次切取5 mm、10 mm、15 mm、20 mm、25 mm、30 mm、35 mm、40 mm、45 mm、50 mm、55 mm、60 mm、65 mm、70 mm、75 mm段的莴苣组织，最终获得15段，每段长度为5 mm。将10片相同部位的生菜置于生理盐水中，用上述方法测定单核细胞增生李斯特氏菌在不同组织中的内化距离。

Table 1 李斯特菌引物设计三、Results

3.1结果：0-20min粘附；20-120min缓慢增殖阶段；〉120min快速增殖阶段Fig. 1 李斯特菌在冰山上菜上的生长曲线3.2 结果：c比b内化距离远，叶片中间比中脉内化深

3.2 结果：c比b内化距离远，叶片中间比中脉内化深

Fig. 2 a生菜正面背面中脉粘附菌量；bcd李斯特从生菜不同部位向外内化的距离

3.3 结果：day0:粘附在气孔处没有形成胞外聚合物和生物膜
day2:形成聚合物，气孔处内化，叶片比中脉菌量多
day4：叶片中脉的李斯特增殖
day6-8:生物膜形成

Fig. 3 扫描电镜观察a中脉midrib和b叶片Leaf blade

3.4结果：在0h浮游细胞悬浮在墨上，在2h观察到透明区域在增殖阶段形成生物膜（a、b图）

疏水性随着时间的延长（增殖）降低（c图）

未接种和接种之间ECC存在显著差异，未接种生菜ECC储存之间不断降低，接种生菜ECC含量不断升高（Fig. d)

Fig. 4. 李斯特生物膜成像0h(a)和2h(b)疏水性检测(c)胞外碳水化合物检测(d)

3.5结果：0-2h：actA,hly,inlA上调；flaA，motA，motB,inlJ，inlB，iap下调；sigB，prfA无显著变化

2-4h：flaA，motA上调；motB, iap, inlB, inlJ, actA，sigB下调；inlA, hly prfA无显著变化Fig. 5 实时荧光定量检测增殖过程中基因变化

Fig. 6 李斯特菌基因功能机体示意图

四、Conclusion

单胞菌在冰山莴苣上的附着和增殖阶段分别为0-20分钟和20分钟后。在附着方面，单胞菌首先聚集在一起，主要附着在气孔和皱纹上，叶片上的聚集物比中脉上的要多。一旦生菜上有伤口，单胞菌就会沿着伤口内化到内部组织，中脉的内化距离比叶片的要远。同时，细胞通过分泌生物膜来促进其附着。在增殖方面，flaA和motA基因调节运动，actA和inla调节感染，细胞外物质的分泌促进了单胞菌生物膜的形成。此外，单胞菌在叶片上的生物膜形成比在中脉上的生物膜形成快，但在中脉上形成的生物膜比叶片上的生物膜更密。

五、生词积累

1. Extracellular carbohydrate complex 胞外碳水化合物复合物
2. layer of hydrophobic wax 疏水蜡质层
3. leaf blade 叶片
4. adaxial 正面背轴面向阳面
5. abaxial 里面背轴面
6. midrib surface 中脉面
7. planktonic 浮游生物
8. up-regulated 上调
9. Schematic diagram of the functioning organism 功能机体示意图