李清予
李清予

二次扩增产物条带弥散_RT--PCR之后琼脂糖电泳应该是弥散的还是有很多条带？...

差异显示的PCR产物用琼脂糖凝胶电泳可以跑出条带，为什么会是弥散的呢？

见文献：

(6)Sokolov等首次用琼脂糖凝胶电泳,

EB呈色替代聚丙烯酰胺电泳和射自显影,使

得工作大大简化[13]。崔凯荣等对该方法加以

改进,利用DD-PCR成功地得到3个在枸

杞体细胞胚发生早期组织中基因特异表达的

片段。这种方法有两大显著特点:一是Liang

等的建立的DD-PCR技术实验时间较长,

所检测的cDNA片段仅100-600bp;而该方

法可检测出大于3000bp的cDNA片段;二

是Liang等所建立的DD-PCR技术用6%

的测序聚丙烯酰胺凝胶电泳,扩增时要加入

同位素,还要放射自显影,因此实验周期长

成本高、易造成环境污染,实验的限制因素较

多;而该方法扩增时不加同位素,扩增结果在

琼脂糖凝胶上进行检测,实验设备和操作均

很简便,可准确容易地回收差异片段,省时

成本低、无污染,在一般实验室就可进行实

验,限制因素少[14]。

发表于 2021-01-14

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