增值表型

增殖是最常见的表型,可以从分子/细胞/组织/动物,四个层面上进行相关的检测。 

▲在分子层面上,可以检测与增殖相关的分子标志物,常见的有三个 PCNA,Ki-67 和MCM。目前,在临床和科研工作中,应用最广泛的还是 PCNA 和 Ki-67。还有两类和增殖间接相关的分子标志物:一类是干细胞相关的分子标志物;另一类是检测抑癌基因。但是干细胞相关的分子标志物和抑癌基因的检测,相对不太常用。 

▲在细胞层面上,检测增殖相关的表型有:1)增殖现象;2)克隆形成现象。 检测增殖现象的方法有三种:1)MTT 比色法;2)Brdu 染色法;3)RTCA(real time cell analyzer,实时细胞分析法),其中 MTT 比色法和 Brdu 染色法是经典方法,RTCA 对于硬件设备的要求很高,成本高昂。检测克隆形成,可以使用克隆形成实验(colony formation assay)。 

▲在组织层面上,1)可以通过免疫组化的方法,检测增殖相关的分子标志物(PCNA,Ki-67 和 MCM);2)通过形态学,检测细胞形态和组织结构上的差异。 - 9 - 

▲在动物层面上,检测增殖表型最常用的动物模型是移植瘤动物模型。通过移植瘤动物模型检测增殖表型时,需要记录移植瘤的大小/体积,重量等参数。通过动物的移植瘤样本,同样可以检测增殖相关的分子标志物。另外,由于移植瘤中,细胞发生急剧的增殖,会导致移植瘤内部因为缺少氧气和养分而形成坏死区域,通过形态学检测移植瘤内部的坏死区域,也是评估增殖的有效手段。 

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