2022-07-01

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TME

引至https://mp.weixin.qq.com/s?src=11×tamp=1657763123&ver=3919&signature=n7cyWM9n3cVBzl5-1HM7I403FzVtEL0TXZifGqrC739Pn2HfoA578PQSH2JMtaypQXttNyzdNa0WPHewhdEAEwyZc5O6O4Ox8*ePeM4cyvJ1VmWvK2c7RMRMsjRb&new=1

体外评价模型中使用的抗原提呈细胞主要有骨髓来源树突状细胞( bone marrow-derived dendriticcells，BMDC) 、鼠树突状细胞系( 如JAWSII) 、鼠淋巴瘤细胞系( 如RAW-S) 和人淋巴母细胞系( 如T2) ，效应细胞主要有脾细胞、外周血单核细胞( peripheralblood mononuclear cell，PBMC) 和TILs，其中评价TILs 的数量和质量越来越受到重视，靶细胞主要为各类肿瘤细胞; 实验常用的T 细胞抗原特异性标志物为HLA-抗原四聚体，效应标志物为IFN-γ、穿孔素、颗粒酶B、TNF-α 和细胞因子( 如IL-2， IL-4， IL-6， IL-10 和IL-17α) ，这些标志物的检测方法主要包括流式细胞术、酶联免疫斑点实验( enzyme-linkedimmunospot assay，ELISPOT) 和酶联免疫吸附实验( enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA) 。
常用的杀伤效果标志物为51 Cr( 如51 Cr 释放实验) 、荧光素酶( 如荧光素酶细胞毒实验) 和caspase 3 /7 ( 如caspase 3 /7 活化凋亡实验) 。
体内评价实验主要使用小鼠( 如C57BL /6，BALB /c，DBA/2 和B6D2F1) 建立免疫反应模型、免疫预防性或免疫治疗性移植瘤模型，药效指标主要包括血清特异性抗体、不同组织( 血液/脾/肿瘤) 中抗原特异性CD+8 T 细胞、肿瘤体积或质量、肿瘤转移数和动物生存时间。
目前，研究人员针对黑色素瘤( B16F10) 、结肠癌( MC-38 和CT26 ) 、卵巢癌( ID8-G7 ) 、胰腺癌( Panc02) 、淋巴细胞白血病( L1210) 、乳腺癌( 4T1)和骨髓瘤( 5TGM1) 多种肿瘤进行了个体化治疗性疫苗的临床前药效学研究。
详见 中国新药杂志 2020年 第29卷第21期

OT-1小鼠由于被转入Tcra-V2 (Vα2) 和Tcrb-V5 (Vβ5) 两个基因，其CD8+ T细胞的TCR只能够识别OVA的257-264肽段(SIINFEKL)，是单克隆的淋巴细胞。也正是因为OT-1小鼠的CD8+ T细胞只能识别OVA而无法识别其他的抗原，所以这些小鼠的免疫系统都是缺陷的。
H-2Kb–SIINFEKL tetramer才是鉴别OT-1小鼠最好的指标。
https://mp.weixin.qq.com/s?src=3×tamp=1657767846&ver=1&signature=oyqCnbCdP5Xim59h8MaWe2U90k7jsY-YfEYFqiKZ-8O70o2RQHy*1ctjRhxaYMJtw2u1p9GOgtkcybNToZOIDwd18h67LJiZJDtxCnaeDhC5frsssaWMZMdKdbbJUeXZMwp0go3ev2QiqYSOWLRlPhlL60xop63NwYfv6oS3z58=

可表达半乳糖苷酶的CD8+T细胞杂交瘤细胞系B3Z细胞
T Cell T cell hybridoma expressing a TCR that specifically recognizes OVA(257–264) (SIINFEKL) in the context of H-2Kb. The cells carry a beta-galactosidase (lacZ) construct driven by NF-AT elements from the interleukin 2 promoter
CXCL10 release has been recently considered as a new ICD marker, high expresion is good to immune.

T cell surface expression of activation marker CD69
effector molecules IFNγ and Gzm B on T cells
tumor vasculature reflected by CD31 staining
Batf3−/− mice that were deficient in type I conventional DCs