磁珠法通用核酸提取的操作步骤有哪些?

产品特点

◎操作简便快速,可在30分钟内获得理想的核酸,适用于较多样本的批量提取;

◎提取核酸纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.8-2.0;

◎采用自主研发的改性硅基磁珠,同样的样本量提取的核酸更多。

产品介绍

BIOG Routine NA Mag-B Kit是常州百代生物科技股份有限公司研制的专门用于提取口腔拭子、泌尿生殖道拭子、细胞悬液、组织悬液、唾液、尿液和水样等样本核酸的试剂盒。BIOG Swab NA采用独特的裂解液配方,细胞裂解快速彻底,核酸提取效率高。试剂盒采用了我们自己研发的改性硅基磁珠,核酸吸附能力强,提取核酸纯度高。试剂盒操作简便快速,特别适用于一次试验较多样本的批量提取。与同类产品相比,提取得到的核酸纯度更高,产量更大,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染,可以直接应用于各种PCR检测和常规分子生物学实验。

操作步骤

1. 请自行准备:无水乙醇、异丙醇、1.5mL离心管。

2. 取出洗涤液,按以下操作:

a) 洗涤液A:按终浓度30%的比例加入无水乙醇,如21mL加入9mL无水乙醇;42mL加入18mL无水乙醇,混匀。

b) 洗涤液B:按终浓度70%的比例加入无水乙醇,如9mL加入21mL无水乙醇;18mL加入42mL无水乙醇,混匀。

c) 请按需配制洗涤液,尽量不要多配。配制后的洗涤液如一次使用不完,可严格密封后放于室温阴凉处保存,1周内使用完毕。

3. 取1.5mL离心管,加入0.2mL 裂解液、20μL 消化液,再加入0.2mL样本,振荡混匀,65℃温育10 分钟。

4. 冷却到室温,加入0.2mL异丙醇,充分混匀。再加入20μL磁珠复合液(每次使用前须充分混匀),振荡混匀3min(注意不要颠倒混匀,以防磁珠粘附于管盖内壁)。

5. 将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附,开盖,彻底吸弃上清液(注意枪头不要接触磁珠)。.

6. 加入0.5mL配制后的洗涤液A,将离心管从磁力架上取下,中速振荡2min,确保磁珠完全分散。再将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附,开盖,彻底吸弃上清液(注意枪头不要接触磁珠)。

7. 加入0.5mL配制后的洗涤液B,将离心管从磁力架上取下,中速振荡2min,确保磁珠完全分散。再将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附,开盖,彻底吸弃上清液(注意枪头不要接触磁珠)。

8. 将离心管从磁力架上取下,开盖,干燥约3-5min,至无明显乙醇气味 (注意乙醇要挥发干净)。

9. 加入40 μL洗脱液,振荡至磁珠充分散开,60℃温育2min,振荡混匀30 sec。

10. 将离心管置于磁力架上,待磁珠完全吸附后,小心吸取上清液至一新的1.5mL离心管中,提取的核酸可直接用于下游实验,或-70℃保存

备用。

注意事项:

1、本试剂盒与1.5mL离心管磁力架配套使用,可选用BIOG 多功能通用磁力架。

2、本试剂可用于DNA提取,也可用于RNA提取,试剂盒内液体已经去RNA酶处理,但如用于RNA提取,实验所用器具也应除去RNA

酶,实验中最好戴一次性洁净手套、口罩,提取的RNA溶液可适当加入RNA保护因子(货号:51090,一般50μLRNA溶液加入3μL。)

3. 裂解液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻,洗涤液在使用前应加入乙醇后充分混匀。


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