嘉期几许

细胞计数

吸弃培养基中原培养基
用PBS清洗2次
加入1ml 0.25%胰酶进行消化
待消化完全后，继续加入1ml含10%FBS的1640培养基终止消化
吹打混匀，移入15ml离心管中
800r/min，离心5min，弃上清液
加入1ml含10%FBS的1640培养基重悬细胞
吸取10ul细胞悬液至1.5ml离心管中，加入90ul含10%FBS 的1640培养基，吹打混匀
用95%乙醇擦拭干净细胞计数板及盖玻片，盖玻片盖在计数板上方
吸取10ul细胞悬液缓慢加入（沿计数板边缘），避免产生气泡
低倍镜下观察计数板，确认细胞平均分布，无气泡
高倍镜下计数，计算四角大方格内的细胞数，压线细胞只算左侧和上方
计算（细胞密度）：稀释后细胞数/ml = 四大格细胞总数/4 *10000
（1ml是因为加了1ml的含10%FBS的1640培养基）

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