Scarlettqiny
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据说这个实验黑洞，大部分人都会陷进去

实验做得多了

可能会变成科学家

但也可能会变成思想家

据说这个实验黑洞，大部分人都会陷进去_第1张图片

活泼可爱的小师妹到实验室一年后

现在开口都是些人生感悟

满满的沧桑感


据说这个实验黑洞，大部分人都会陷进去_第2张图片

▼

实验失败，有时候是有原因的，然而有时候却没有理由……

小师妹，何出此言？

感觉谁也拯救不了我的PCR了。从仪器耗材到实验条件，再到模板试剂，已经全部优化过，还是搞不清楚哪个环节出了问题。

引物呢？

也重新设计、合成过了……

RIO？你确定这样就能保证你的引物没问题？

▼

很多人以为引物的问题都源于

「设计与合成」

却往往忽略了另一个关键的步骤：

纯化

▼

为什么要纯化？

在引物合成过程中，偶联反应的效率可达到99%，也就是说，每连接上一个新碱基，都会有总量的1%的DNA片段附加不上新的碱基，而这些合成失败的DNA片段全部残留在合成DNA粗制品中，进而影响后续的PCR、测序等反应。

▼

怎么纯化？

常用的纯化方法有：

脱盐(DSL)

高亲和纯化/TON纯化

聚丙烯酰胺电泳(PAGE)

高效液相(HPLC)

为了达到实验所需要的纯度，纯化的流程严谨而复杂，以PAGE为例，一套完整的纯化工艺应当是这样的：

据说这个实验黑洞，大部分人都会陷进去_第3张图片

▼

这不是赛默飞Invitrogen的工艺流程么？

对！这样的品质才能信赖，你早就该订购Invitrogen的引物试试了。

还有「纯度选择指南」等干货可以喂饱你


据说这个实验黑洞，大部分人都会陷进去_第4张图片

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