转录组入门学习(二)

线下课程回顾

1. 生物信息概述

1.1 生物信息所需技能
1.2 入门生物信息的方法

2. 数据如何产生

2.1常见测序平台和测序类型

  • 测什么决定怎么测
  • 干什么决定测多深

2.2. 测序基本原理

  • single end
  • pair end
  • mate pair
  • 链特异性测序

2.3 实验设计

3. 数据如何处理

3.1 数据预处理

  • 原始数据误差的来源
  • 质量控制FastQC结果解读
  • 数据过滤 Trimmomatic 原理和使用方法

3.2 有参转录组序列比对

  • 不同比对软件的比较
  • 常用的序列比对算法
  • 基因组
    • STAR
    • hisat2
  • 转录本:RSEM
  • 实例结果解读
  • 序列比对常见问题

3.3 无参转录组

  • 转录本从头拼接原理
  • 拼接方法 Trinity

3.4 表达定量

  • RNA-seq 常用统计定量单位
  • 基因组比对:Htseq-Count, FeatureCount
  • 转录本比对:RSEM
  • 无比对快速定量:kallisto

4. 数据如何分析

4.1 数据分析的思路

4.2 差异表达

  • Deseq 标准化原理
  • 结果解读

4.3 富集分析

  • GO常用网站和工具
  • 通路富集分析

4.4 数据可视化展示

  • IGV(本地机)
  • 基因浏览器(网上)

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