CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 25？ 正式实验

基础知识系列链接（节选）：

CRISPR-Cas9学习笔记
Cre-LoxP条件性基因编辑系统--学习笔记
FLP-FRT系统--诱导性基因编辑inducible gene editing

系列实验链接：

CRISPR-Cas9基因敲除sgRNA设计
CRISPR-Cas9（三）--sgRNA设计好之后
CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 1
CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 2
CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 3
CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 4
CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 5-15 转染验证
CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 18 转染后验证

经过293FT细胞验证质粒的效果之后，要接着做正式实验了，这里我们用的方法跟文献中的就不一样了。张峰老师组使用的是电转的方法，而我们还是选择了脂质体瞬转的方法，我想这一个实验应该是根据实验室条件来做选择了。因为学院的sorting要提前一个星期预约，所以我们妥妥的又拖延了一周，好不容易做了一次，因为经验不足，细胞也没活（一株超难转的细胞），这周还想接着做，可是管sorting的老师下周休一整周的假，好刺激。Emmm...有点头大，还是应该要提前安排好会更好。流水账一样的记录，所以实验就是有这样那样的插曲。

感谢师兄DZ