权限 | 意义 | 分数权制 |
---|---|---|
w | 写 | 4 |
r | 读 | 2 |
x | 执行 | 1 |
eg: 7=4+2+1 #代表w+r+x权限
man(详细讲解)和–help(使用语法简介)
ls -r #反序排列
ls -sh # 显示目录文件大小
ls -d a* #查看以a开头的目录或文件
cd ~ #切换到当前用户目录
cd - #切换到上一次进入目录
mkdir #创建空目录
mkdir -p #创建多级目录
rmdir -p #删除空目录
touch #创建文件
rm -r #删除目录及目录下文件
cp #复制文件
cp -r #复制目录及目录中的文件
mv #移动/重命名 文件/目录:如果输入目录和输出目录一样则是改名字。
set nu
:列出行号/ charactor
:查找字符wq
:写入并退出q1
:强制退出,不会保存修改cat #查看文件内容,一次性输出
cat 1.txt > 2.txt #1.txt 文件内容取代2.txt文件
cat 1.txt >> 2.txt # 1.txt 文件插入2.txt文件末尾
less / more #分页查看文件内容
less -m #显示百分比
less -N #显示行号
/charactor #查看模式下,向下查找字符。向上是 ?character
b #查看模式下下一页,下半页是d
less -mN
head / tail #查看文件的头部/ 尾部
wc # 显示文件行数、字数
wc -l <file> #输出文件行数
wc -c <file> #输出文件字节数
wc -w <file> #输出文件字节数
wc -L <file> #输出文件最长的一行
ls |wc -l #文件下有多少文件和目录
grep <str> #文件查找,并输出匹配行
grep -c <str> #输出有几行匹配上了
grep -i <str> #不区分大小写
grep -n <str> #显示匹配行及其行数
grep -v <str> #不显示匹配行
grep --color #检索词加颜色,可以和-i -n 等一起用
grep -n --color "the" 2.txt #结果如下
grep "t[ea]st" 2.txt #匹配test 或者tast
grep ^or$ #匹配行首或者行尾
grep [^a]n #匹配除an外含有n的行
grep ^[TI] #匹配以T或者I开头的行
grep ^[^a-zA-Z] #不匹配字母开始的行
sort -n #依据数值大小排序
sort -0 <file> #排序结果存入制定文件
sort -r #反序排列
sort -k #以哪个区间排列
sort -c #检查文件是否按照序列排序
cat file1 file2 | sort | uniq > file3 #两文件并集
cat file1 file2 | sort | uniq -d > file3 #两文件交集
cat file1 file2 | sort | uniq -u > file3 #删除交集,留下各自补集
sed -n #列出经过sed处理过的一行
sed -e #直接在命令行模式进行sed动作编辑
sed -i #直接对原文编辑
sed [参数] 'comand' 输入源文本
sed -n '1~2 p' a.txt #a.txt第一行起始,2行为步长输出到屏幕(P)。奇数行。
sed -n '1,+2 p' a.txt #a.txt第一行起始,起始行后的连续+2行。即前三行。
sed -n '/primary_transcript/,+4 p' genome.gff #包含 primary_transcript 字符文本的一行及其后4行。
sed '1,3 s/e/E/g' a.txt #对1-3行进行e到E的替换
sed -e '1~2 d' a.txt #删除奇数行
sed -e '1,/^chr3/ d' a.txt #定位:从1行开始到以chr3开头到行。操作:删除
sed '^$ d' a.txt #定位:空白行。操作:删除
sed '2 a AT3GGO5780 GO:0000167' a.txt #定位:第二行。操作:在第二行后追加一行。(在第二行之前是i)
1
$
/REGEXP/
first~step
addr,+N
cut -c 2-4 2.txt #2.txt文件每行第2-4共三个字符截取
cut -d '-' -f 2 2.txt #2.txt文件以“-”为分割制表,每行第二列输出.-d ''是指定分割符。默认是tab键
在linux的shell中“tab”键表达方式是control+V+I
^
:ls | grep "^Green"
;grep "^RBM4" 2.txt
$
:ls | grep "1$"
*
:前面字符出现0次或多次。>=0+
:前面字符出现1次或多次。>=1?
:前面字符出现0次或一次。=0 OR =1[ ]
:任意一个字符,数字和字母之间可用-
连接表示范围。[abc]
;[0-9]
;[a-z]
;[a-zA-Z]
。(a | b | c) = [abc]。[^ ]
: 字符非匹配。[^abc]
不匹配a|b|c任意一个。正则表达练习网站:https://regexr.com/
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需要进一步深入学习
速度比较快,准确率高。
hisat2-build Escherichia_coli.fa ./Escherichia_coli
#hisat2对大肠杆菌基因组进行索引构建
bowtie2-build Escherichia_coli.fa ./Escherichia_coli
#bowtie2对大肠杆菌基因组进行索引构建
hisat2 -x Escherichia_coli -1 E_coli_1.test.clean.fq.gz -2 E_coli_2.test.clean.fq.gz --un-conc-gz ./E_coli_bowtie_unmap.fq.gz 2 > ./E_coli_bowtie_align.log | samtools sort -O BAM --threads 4 -o ./E_coli_bowtie_.bam
# -x 指定基因组索引
# -1 / -2 双端测序文件
# --un-conc-gz 将没有匹配的序列存储到文件
# > 将结果输出到log文件
# -O FORMAT 设置最终输出的文件格式,可以是bam,sam或者cram,默认为bam
# -o 设置最后的文件名
# --threads 设置线程数
bowtie2 -x Escherichia_coli -1 E_coli_1.test.clean.fq.gz -2 E_coli_2.test.clean.fq.gz --un-conc-gz ./E_coli_hisat_unmap.fq.gz 2> ./E_coli_hisat_align.log | samtools sort -O BAM --threads 4 -o ./E_coli_hisat_.bam
#注释同上
featureCounts -T 4 -F GTF -t exon -g gene_id -s 0 -Q 10 -C -B -p -a Escherichia_coli.exon.gtf -o ./feature_count.txt E_coli.bam
# -T 线程数
# -F 参考基因注释文件格式默认GTF
# -t 指定gtf注释文件的feature类型。exon 即feature(count的对象)。默认将exon作为一个feature
# -g 指定meta-feature类型。即从注释文件中提取Meta-features信息用于read count,默认是gene_id
# -s 特异性建库
# -Q 质量控制。控制比对reads最小质量值。默认0
# -C 舍弃掉非正常匹配:paired read比对到不同染色体上或者相同染色体但不同链上
# -B paired reads都成功比对到参考基因组的reads才计数
# -p 针对的是双端测序
# -a 基因组注释文件GTF/GFF
# -o 输出文件
featureCounts -T 6 -p -t exon -g gene_id -a anno.gtf -o SRR_fCount.txt SRR.bam
#官网的示例表达简写
cut -f 1,7 feature_count.txt |grep -v '^#' >featureCounts.txt
# 提取第一列(Gene_id)和第七列(counts)数据。并去除空行。输出到文本文件
下一步是差异基因分析。通过实验组和对照组的counts文件比对来分析DE:差异基因。
然后是差异基因的选择。通过设置合适的差异基因筛选条件。padj<0.05,|log2FC|>=1(无生物重复)。
筛选出合适的DE然后进行GO和KEGG分析。
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如上图所示,blast分为blastn
/ blastp
/ blastx
/ tblastn
/ tblastx
工具 | 查询序列 | 使用的数据库 | 适用范围 |
---|---|---|---|
blastn | 核酸 | 核酸 | 核酸序列比对 |
blastp | 蛋白质 | 蛋白质 | 蛋白质序列与蛋白质数据库中的序列进行比较,可以寻找较远的关系 |
blastx | 核酸 | 蛋白质 | 将给定的核酸序列翻译成蛋白质与蛋白质数据库中的序列进行比对,对分析新序列和EST(表达序列标签)很有用 |
tblastn | 蛋白质 | 核酸 | 先将核酸数据库翻译为蛋白,在匹配。对于寻找数据库中序列没有标注的新编码区很有用 |
tblastx | 核酸 | 核酸 | 先将检索序列和核酸数据库全翻译为蛋白再匹配。特殊情况使用 |
EMBL-EBI数据库包括Ensembl数据库
(脊椎动物数据库)和Ensembl Genome
(非脊椎动物全基因组数据库)数据库。
进入Ensembl首页点击上方导航栏的download
进入下载界面,可以选择两种方式下载。可以点击通过FTP下载。进入/pub/
目录。选择最新的数据文件。例如截止2019/3目前最新的是release-95
。/pub/release-95/
下多种基因序列文件。基因组选择fasta/
。注释文件可以选择gtf/
。若要获取基因组文件,依次打开/pub/release-95/fasta/homo_sapiens/dna/
选择相应文件下载。如果需要RNA-seq比对可以选择Homo_sapiens.GRCh38.dna_rm.toplevel.fa.gz
下载。若要获取注释文件,依次打开/pub/release-95/gtf/homo_sapiens/
需要RNA-seq回帖参考,可以选择Homo_sapiens.GRCh38.95.gtf.gz
下载。
下载连接直达:
人类基因组:ftp://ftp.ensembl.org/pub/release-95/fasta/homo_sapiens/dna/
人类基因组注释文件:ftp://ftp.ensembl.org/pub/release-95/gtf/homo_sapiens/
随着众多物种基因组测序的完成,仅仅以纯文本的方式存储 和展示基因组DNA字符将无法满足对测序数据的研究,因此, UCSC应用而生。UCSC能够满足在任何尺度上快速地查询和显示 基因组的内容,以及对基因组序列进行注释,注释内容可以在一个 窗口中显示所有与某一基因组区域相关的信息:定位和序列信息、 已知基因和预测基因、表型和文献支持、mRNA和EST、调控 (CpG岛)、比较基因组信息、SNP、基因组重复元件等。(引自ppt)
需要进一步深入学习
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head() #查看文件开头前十行.查看尾端信息是tail
summary() #统计总结。包括最小值,1/4位值,中位数,平均数,3/4位值,最大值
dim() #显示纬度。eg.输出结果是 150 5 代表有150行5列。
model() #显示对象类型
max() #显示最大值,最小值是 min()
sort() #筛选排序。
sort(iris$Sepal.Length,decreasing = T) #iris数据的Sepal.Length列按照大到小排序(从小到大是decreasing = T)
which.max() #返回最大值大索引下标。最小值是which.min()
iris$Sepal.Length[which.max(iris$Sepal.Length)] #等价于max(iris$Sepal.Length)
median() #输出中位数
length() #显示对象中元素个数。length(iris)=5;length(iris$Sepal.Length)=150
var() #求数据的方差
sum() #对数据求和
t() #转换表格的坐标轴直接转换。
R中的对象(数据集合):向量、矩阵、数据框、数组、列表。
对象的五种基本类型:字符型(character)、数值型(numeric,包括小数 )、整型(integer)、复数型(complex)、逻辑型(logical,TRUE/FALSE)
对象的属性:名字(names,dimnames),维度(dimensions, 包括矩阵等),类别(class,包括数字、整数等), 长度(length) attributes() 查看对象属性,没有属性返回NULL
a <- c(1,2,3,4) # 为a赋值numeric 数值型
b <- c(1:4) #为b赋值integer数值型
c <- c("hello","world") #赋值charac字符型
d <- c(TURE,FALSE) #赋值为logical逻辑型
a <- c(11:20)
#生成以一个整形向量,11~20共十个元素
a
#列出a的所有元素
a[1]
#访问a中第一个元素即 11
a[c(1,3,5,7)]
#访问a中第1,3,5,7个元素,注意是 a[c(1,3,5,7)] ,而不是 a[1,3,5,7] 这是矩阵的访问格式
a[3:8]
#访问a中第3~8个元素
x <- matrix(data = c(11:30) , nrow = 5 , ncol = 4 , byrow = FALSE)
#matix 创建向量
#data=c(11:30) 数据输入
#nrow = 5,ncol = 4 有5行4列
#byrow = FALSE 依据列填充,依据行填充是 byrow = TRUE
y <- c(11:20) #向量型y
y #查看向量型y内容
dim(y) #查看y的纬度信息
dim(y) <- c(2,5) #重新定义纬度信息2行5列
dim(y) #显示变量y的纬度信息
y #查看矩阵y的信息
z1 <- c(11:13)
z2 <- c(21:23)
z <- cbind(z1,z2) #通过列对齐,对向量z1,z2合并.行对齐是rbind
dim(z)
x <- matrix(data = c(11:30), nrow = 5, ncol = 4, byrow = FALSE)
#创建矩阵
x[3,3]
#访问第3行第3列元素
x[3,]
#访问第3行所有元素
x[,3]
#访问第3列所有元素
x[3]
#访问第3个元素,顺序与矩阵生成byrow参数有关
x[1:2,]
#显示前两行元素
x[,3:4]
#显示第3到4列元素
#------------------------------------------------------------------#
#对于有标题到矩阵可以直接通过标题访问
y <- matrix(data = c(11:30),nrow = 5,ncol = 4,byrow = FALSE,dimnames = list(c('r1','r2','r3','r4','r5'),c('c1','c2','c3','c4')))
# 创建矩阵的过程中重命名行索引名称、列索引名称.如果不设置行名,可以填写NULL
y['r3','c3']
#访问第r3行r3列元素
transcript_id <- c('TUCP_1','TUCP_2','lncRNA_1','lncRNA_2')
# 创建字符型向量
treat <- c(1,2,3,4)
#创建数值型向量
control <- c(5,6,7,8)
# 创建向量
chr <- c('chr1','chr2','chr3','chr4')
# 创建向量chr
testdata <- data.frame(transcript_id,teat,ctrol,chr)
# 创建数据框testdata
dim(testdata)
# 查看数据框testdata的维度信息
#--------------------#
#也可以为数据库添加题头
tdaddrowname <- data.frame(transcript_id,treat,control,chr,row.names = c('r1','r2','r3','r4'))
# 为创建的数据框tdaddrowname更换行索引
taddrowname
#查看数据框的内容
tdaddrowname[,2:3]
#显示数据框中的第2列、第3列数据
tdaddrowname[c('transcript_id','chr')]
#选取多列
#矩阵访问的方式同样使用于数据框的访问
tdaddrowname$transcript_id
#如果数据框有列名,可以是直接使用$直接调用该列,直接调用该列
#------------------------------------#
inform <- names(tdaddrowname) %in% c('trancript_id','chr')
#names()获取对象的或者设置对象的名称
#%in%相当于match()函数的一个缩写。用来判断一个数组或矩阵是否包含在另一个数组或矩阵里。
#A %in% B,若A中元素有和B中相匹配,则返回逻辑型 TURE,不匹配则返回逻辑型 FALSE
newtd <- tdaddtowname[!inform]
#反向选择非匹配的列
newtd
#查看
x1 <- array(data = c(11:30))
#创建一纬数组
x2 <- array(data = c(11:30),dim = c(4,5))
#创建二维数组
length(x2)
#查看元素个数
dim(x2)
#查看纬度信息
x3 <- array(data = c(11:37),dim = (3,3,3))
#创建三维数组
x3 <- array(data = c(11:37),dim = c(3,3,3),dimname = list(c('r1','r2','r3'),c('c1','c2','c3'),c('m1','m2','m3')))
#创建有索引标题的三维数组
length(x3)
dim(x3)
x3
#查看 x3 的属性和元素
x1
#一纬数组的访问和向量访问一样
x2[2,3]
x2[1,]
#二维数组的访问和矩阵的访问方法一致
x3['r1','c2','m3']
#依据索引访问元素
x3[1,2,3]
#依据元素的纬度信息访问元素
x3[,,3]
#依据纬度信息,访问第三面的所有元素
x3[,'c2',]
#依据索引,访问所有面第二列元素
xlist <- list(c(1:5),matrix(data = c(1:10),nrow = 2,ncol = 5,byrow = FALSE),123,TRUE)
# 定义新列表
length(xlist)
# 查看列表中的元素个数
xlist
# 查看列表xlist的全部信息
dim(xlist)
# 列表没有维度信息
dim(xlist) <- c(2,2)
dim(xlist)
class(xlist)
# 一旦给列表添加了维度信息,等价于转换成了矩阵格式
############# list访问 ############
xlist <- list(c(1:5),matrix(data = c(1:10),nrow = 2,ncol = 5,byrow = FALSE),123,TRUE)
# 定义新列表
xlist[[1]]
# 访问第一个元素
class(xlist[[1]])
# 属于向量中的范畴,可以在此基础上进行“向量访问”
xlist[[1]][2:4]
# 访问列表第一个元素(向量类型)的第2至5的元素
xlist[[2]][1,3]
# 访问列表中矩阵元素的第一行、第三列的元素
xlist[[2]][2,]
# 访问列表中矩阵元素的第二行所有数据信息
xlist[[c(2,4)]]
# 列表第二个元素的第4个元素
read.table()
函数xlsdata1 <- read.table(file = "FPKM.xls",header = TRUE, sep = '\t', stringsAsFactors = FALSE,row.names = 1)
# read.table 读取文件
# file="FPKM.xls" 要读取的文件
## header=TRUE 读取表头
## sep='\t' 设置列间隔是tab
# stringsAsFactors = FALSE #不作为因子?
## row.names = 1 设置行标题为第一列
write.table(x = iris,file = 'test_iris1.xls',append = FALSE,sep = '\t',row.names = FALSE)
# write.table() 数据导出
# x=iris 数据集
# file = 'test_iris1.xls' 导出文件名
# append = FALSE 不以追加模式导出
# sep='\t' 分隔符是TAB
# row.name=FALSE 不导出行名
先定位再处理
x <- c(1,3,NA,7)
# 赋值向量
is.na(x)
### 查询x中元素是否有NA值,如果是则在该元素纬度坐标中返回TURE,不是返回FALSE
table(is.na(x))
### table()可以对元素进行统计并计数。
sum(x,na.rm = TRUE)
## 在统计向量时候通过 na.rm = TRUE 来移除 NA 值,很多函数都有这个选项
x[which(is.na(x))] <- 0
### which()函数返回符合条件的响应位置,which(is.na(x))会返回TURE对位置
# which(b[,3]==1.7) 查询b的第三列中数值是1.7的位置
# 把NA位置选出然后用0代替
# 还可以使用 x[is.na(x)] <- 0 来代替NA
test <- data.frame(x=c(1,2,3,4,NA),y=c(6,7,NA,8,9))
# 构建数据框
which(is.na(test),arr.ind = T)
### which(is.na(test)) 可以匹配NA值,arr.ind =T 可以返回相应返回行列坐标,适用于多维数据。如果没有arr.ind = T 则返回一个序列数。
test[which(is.na(test),arr.ind = T)] <- 0
#结合which进行多维数据类型的缺失替代
na.omit(test)
## 可以直接删除NA值所在的一行数据
stack()
data('PlantGrowth') #加载数据
fomula(PlantGrowth) #查看格式
pg <- unstack(PlantGrowth)
# 将数据去堆栈排列
stack(pg)
# 将多列多数据堆栈排列
stack(pg,select = ctrl)
# 选择名为 ctrl 的特定向量
stack(pg,select = -ctrl)
# 选择并删除向量
## stack只使用于向量数据类型?
cbind / rbind()
x <- matrix(data = c(1:10),nrow = 5, ncol = 2)
y <- matrix(data = c(21:30),nrow = 2,ncol = 5)
xyr <- rbind(x,y)
# 将 x,y 依据行方向结合在一起
xyc <- cbind(x,y)
# 将x,y 依据列方向结合在一起
## cbind & rbind 结合的必须是相匹配的 例如cbind 需要列一致
merge()
ID <- c(1,2,3,4)
name <- c('li','zhang','zhou','wu')
score <- c(23,45,67,98)
st1 <- data.frame(ID,name)
st2<-data.frame(ID,score)
st <- merge(st1, st2, by = 'ID')
# 按照ID的对应关系将st1 st2的信息合并
merge(ink1,ink2,by="id",all=T)
#所有数据列都放进来,空缺的补值为NA
merge(ink1,ink2,by="id",all=F)
#默认,只取两者的共有的部分
subset()
filedata <- read.table(file = "FPKM.xls",header = TRUE,sep = '\t',stringsAsFactors = FALSE)
class(filedata)
dim(filedata)
summary(filedata)
newset <- subset(x = filedata , subset = (treat2 > 100),select = treat1:control3)
#subset 依据要求返回向量、矩阵、数据框的子集
#x=filedata 数据输入
#subset = (treat2 > 100) 选取treat2一列大于100的元素
#select = treat1:control3 界定选取子集的 元素/范围/哪几列
melt
names <- c('A','B','C')
yuwen <- c(87,67,98)
shuxue <- c(78,69,88)
yingyu <- c(56,64,77)
xingbie <- c('F','M','F')
chengjidan <- data.frame(names,yuwen,shuxue,yingyu,xingbie)
chengjidan
newtable <- melt(data = chengjidan,id.vars = c('names','xingbie'),variable.name = 'kemu',value.name = 'fenshu')
R语言中有多种函数支持正则表达匹配,其中比较常用的是grep、gsub、grepl
#完整的grep参数
grep(pattern, x, ignore.case = FALSE, perl = FALSE, value = FALSE, fixed = FALSE, useBytes = FALSE, invert = FALSE)
#grep() 查找特定格式元素。查找,存在参数value,返回结果是匹配项的下标
#pattern 正则表达式
#x 字符向量
#ignore.case=FALSE 默认选项式FALSE表示区分大小写,不区分式TURE
#perl=FALSE 默认false,表示兼容perl正则表达
#fixed=FALSE 如果为TRUE,pattern是要匹配的字符串。覆盖所有冲突的参数
#useBytes=FALSE 默认选项FALSE,TURE情况下是逐字节匹配而不是逐字符匹配
#invert = FALSE 如果是TURE则不返回元素索引或值
函数 | 作用 |
---|---|
grep() | 查找,存在参数value,返回结果是匹配项的下标 |
grepl() | 查找,返回值为true |
sub() | 只对查找到的第一个内容进行替换。(同下) |
gsub() | 对查找到的所有内容进行替换,返回替换后的text;否则 直接返回text |
表格引自ppt
string1 <- 'qwewertyuioplkjhjnmbvc,fdsaa,email:[email protected]'
string2 <- '112351426325637,tel:0643-3445676,tel:0654-6778877,7655263529987352414099827tel:72625637784383726'
grepl("[a-z]+@[0-9]+.c(n|om)",string1)
#匹配 ‘字母@数字.com’或者'字母@数字.cn'格式的元素,有的话返回TURE
grepl("[0-9]+-[0-9]+",string2)
#匹配 ‘数字+-+数字’格式的元素
R语言的四套图形系统:base、grid、lattice、ggplot2。随着ggplot2的发展越来越成为主流。
常用?元素属性可以直接通过元素参数设置
元素参数 | 意义 |
---|---|
font | 字体 |
lty | 线类型 |
lwd | 线宽度 |
pch | 点类型 |
xlab | 横坐标 |
ylab | 纵坐标 |
xlim | 横坐标范围 |
ylim | 纵坐标范围 |
例如部分属性如下
属性 | 意义 |
---|---|
col | 颜色 |
cex | 缩放倍数 |
font | 字体 |
部分元素如下
元素 | 意义 |
---|---|
main | 标题 |
sub | 副标题 |
axis | 坐标刻度 |
lab | 坐标轴标签 |
因此。col.main 即 标题的颜色;cex.main 标题的缩放倍数;font.sub 副标题的字体样式。等等
一些特异性属性需要用到函数来修改
如legend(location, title, legend, ...)
来修改图例的属性
画图 | 软件包 |
---|---|
热图 | pheatap |
韦恩图 | VeinnDiagram |
PCA图 | ggplot |
箱线图/小提琴图/散点图/直方图/密度分布图/柱状图/气泡图/火山图 | ggplot2 |
ggplot2特点
library(ggplot2)
setwd("~/SUPER QUN/3.2.2") #设置工作目录
fp <- read.table("FPKM.xls",header = T ,row.name = 1) #读取目录
head(fp)
bar <- ggplot(fp) + geom_bar(aes(x = category, fill = strand),posirion = "fill")
#ggplot(fp) 指定作图文件为fp
#geom_bar() 是ggplot2中一种作图的软件。作用是通过映射,用条形图的高度来展示数值多少
#aes(x=category,fill=strand) 表示映射关系,横轴展示分类,通过填充不同颜色来区分strand 这里也可以吧映射放到ggplot(fp,aes())里面,但是这样相当于全局映射,不便于添加其他元素和映射
#position="fill" 表示strand里面两个元素的展示方式。可以有三种方式"stack"(堆叠),"dodge"(并列显示)和"fill"(百分比填充),默认为"stack"。
#这里面是ggplot自动统计来正负链个数
加油。再来一遍吧!