甲基化数据QC: 使用甲基化数据推测SNP基因型（ewastools工具）

介绍一下如何使用ewastools推测甲基化数据的SNP基因型

下载、安装ewastools

以下例子是ewastools的安装，其他的包比如magrittr、svd等, 电脑没装的话，也需要一一装上去。
如果install.packages()装不了，就用BiocManager::install()安装。
生物信息的R包，用这两个跑不了。

install.packages("devtools")
library("devtools")
devtools::install_github("hhhh5/ewastools@master")
library(ewastools)
library(stringi)
library(data.table)
library(magrittr)   
library(purrr)
library(svd)
library("dplyr")

导入数据

这里依旧用的是minfi的示例文件。

先下载、安装minfi包：

BiocManager::install(c("minfi","minfiData","sva"))
library(minfi)
library(minfiData)
library(sva)

导入甲基化数据：

baseDir <- system.file("extdata", package="minfiData")
targets <- read.metharray.sheet(baseDir)
RGSet <- read.metharray.exp(targets = targets)
manifest <- getManifest(RGSet)
manifest

甲基化的数据如下，我们可以看到，这里是有65个SNP探针位点的。

image

提取甲基化数据中的SNP

使用minfi包的getSnpBeta函数提取甲基化数据中的SNP位点以及对应的数值。

snps <- getSnpBeta(RGSet)
head(snps)

image

对甲基化数据call SNP的基因型

将上面一步提取出来的甲基化SNP位点进行基因型的calling。

使用ewastools包的call_genotypes函数：

genotypes = call_genotypes(snps,learn=FALSE)

提取推测的基因型：

ge3=data.frame(genotypes[3])

提取异常值：
outliners=genotypes$outliers

结果解读

结果如下所示，每一行表示一个SNP，每一列表示一个样本。所以这里显示有6个样本，4个SNP。

每个样本的每个SNP会call出三种不同的分布（分别对应截图显示的第一列、第二列、第三列）。

三种分布对应着三种基因类型：minor纯合子、杂合型、major纯合子。

如果第一列的值大于第二列、第三列、异常值，那么该位点为纯合子；

如果第二列大于第一列、第三列、异常值，那么该位点为杂合子；

如果第三列的值大于第一列、第二列、异常值，那么该位点为纯合子；

如果该位点的异常值大于第一列、第二列、第三列，那么该位点的基因型无法推测；

第一列和第三列哪个对应的是minor纯合子和major纯合子，则需要进行统计计算。

第一列、第二列、第三列示意图：

image

异常值示意图：

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举个例子，如下两张截图所示，对于第一个样本的第一个位点，其三个分布的值为6.137597e-08、9.999999e-01、2.552103e-11，异常值为0.03273036。显然第二列的值最大，因此该样本在该位点的基因型为杂合子。

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