微生物核酸提取需要多久？

产品特点

◎操作简便快速，20分钟左右即可完成样本中微生物核酸的提取；

◎提取核酸纯度高，无抑制剂，1.75

◎独特的裂解液配方，适合于血液、唾液、拭子、水样和粪便中微生物核酸的提取，特别适合于家畜微生物感染的分子检测。

产品介绍

BIOG 微生物核酸提取试剂盒是我公司研发团队在综合比较了国外同类优质产品的基础上反复研制优化而成，专门用于样本中微生物核酸的快速提取纯化，特别适合于猪、牛、羊等家畜微生物感染的分子检测。本试剂盒采用独特的裂解液配方，可直接从新鲜、冷冻或陈旧的全血、拭子、唾液、水样、粪便、土壤等样本中提取高质量的微生物核酸，操作简便快速，20分钟左右即可完成微生物核酸的提取。核酸提取得率较高，可在200μL全血中提取2-4μg左右核酸。BIOG 微生物核酸提取试剂盒采用了最新的优质离子膜，裂解液和洗脱液经过多次优化，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染，特别适用于样本中微生物包括细菌、病毒等感染的分子检测。

操作步骤 （请自行准备无水乙醇、异丙醇和灭菌1.5mL离心管）：

1. 取出洗涤液，按以下操作：

a) 洗涤液A：21mL加入9mL无水乙醇；42mL加入18mL无水乙醇，混匀。

b) 洗涤液B：18mL加入42mL无水乙醇；36mL加入84mL无水乙醇，混匀。

c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。

2. 取1.5mL离心管，加入200μL血液或其它样本，再加入200μL 裂解液及40μL 消化液，振荡混匀，65℃水浴10 分钟。

3. 加入150μL异丙醇（总体积的25%），混合均匀，如有半透明悬浮物，不影响DNA的提取与后续实验。

4. 将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液；

5. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液A至吸附柱内，静置1分钟，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。

6. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。

7. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。

8. 按每份样本30μL 取洗脱液（如10份提取样本，即取300μL 洗脱液），放置于灭菌1.5mL离心管，65℃预热。

9. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 离心2 分钟，离去残留的洗涤液。

10. 取出吸附柱，放入新的1.5 mL 灭菌离心管内，在吸附柱中心加入30 μL 预热洗脱液，静置2分钟，12,000 rpm 离心1分钟，收集核酸溶液，提取的核酸即可用于下一步实验或-20℃保存。

注意事项：

1. 裂解液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。裂解液如拆封后未使用完毕，应及时旋紧管

盖，密闭保存。

2. 单次血液标本用量一般为200μL，如血液量较多，请使用BIOG中量全血核酸提取试剂盒。

3. 为防RNA酶污染，实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩，使用处理过的无RNA酶的容器和无RNA酶的超纯水。

4. 提取的DNA如暂不使用，应-20℃保存，RNA应-70℃保存，可适当加入RNA保护因子（货号：51090，一般50μLRNA溶液加入2μL）。