质粒图谱的认识

1.复制起始位点:Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。F1启动子(f1 ori)代表的是噬菌体的复制起始方向,只能复制出单链的DNA

2.抗生素抗性基因:单词最后会以大写R或上标r结束。

Ampr 氨苄青霉素,水解 β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。

tetr 四环素,可以阻止四环素进入细胞。

camr 生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。

neor(kanr)氨基糖苷磷酸转移酶 使 G418(长那霉素衍生物)失活。

hygr 潮霉素,农杆菌里常用的。使潮霉素 β 失活

Kan(卡那霉素,常用)、Cmr(氯霉素,某些酵母表达质粒)、SM(链霉素)、

3.多克隆位点 MCS:它具有多个限制酶的单一切点。便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。

4.P/E 启动子/增强子

P:这个一般是代表启动子。常见的启动子有:CMV、EF1(这俩是启动长片段的),H1、U6(启动短片段的,比如shRNA),35S、2×35S(做植物的应该懂的)。

5.Terms 终止信号

加 poly(A)信号:可以起到稳定 mRNA 作用。pA:这个就是转录终止位点poly A。

关于质粒:https://mp.weixin.qq.com/s/PDpdOKAkVj5Fa3SiaZr6MA

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