Cy3 NHS氨基分子的NHS标记Cyanine3 NHS ester星戈瑞

Cyanine3 NHS ester(又称Cy3 NHS ester)是一种用于荧光标记生物分子的化学试剂,通常用于蛋白质、核酸、抗体等生物分子的标记。下面是关于使用Cy3 NHS ester标记含有氨基官能团的生物分子的基本步骤:

材料:
1.Cy3 NHS ester:这是标记试剂,它含有Cy3荧光染料和NHS ester官能团。
2.含有氨基官能团的生物分子:例如,蛋白质、氨基核酸、抗体等。
3.缓冲液:通常选择碱性缓冲液,如碳酸氢盐缓冲液(pH 8.5-9.0)。

步骤:
1.制备生物分子:首先,您需要准备您要标记的生物分子。确保它们含有可反应的氨基官能团。如果生物分子已经处于溶液中,确保其在适当的缓冲液中。

2.制备Cy3 NHS ester溶液:将Cy3 NHS ester溶解在合适的有机溶剂中,例如二甲基亚酰胺(DMF)或二甲基硫醚(DMSO)。制备的浓度取决于您的实验要求,通常为1-10 mM。

3.混合物反应:将Cy3 NHS ester溶液与生物分子混合。确保在碱性条件下进行反应,因为NHS ester官能团需要碱性环境才能有效反应。通常,pH 8.5-9.0是一个合适的范围。

4.反应保护:在室温或4摄氏度下,将混合物孵育一段时间,通常为1-2小时,以确保反应充分进行。反应时间可能会根据您的生物分子和Cy3 NHS ester的浓度而有所变化。

5.净化:在反应结束后,您可能需要对混合物进行净化,以去除未反应的Cy3 NHS ester和其他杂质。净化方法可以包括凝胶过滤、离心或柱层析等。

6.验证:最后,您应该验证标记的生物分子是否成功,并检查其荧光性质。这可以通过吸收光谱、荧光光谱、SDS-PAGE凝胶电泳等方法来完成。

请注意,具体的实验条件和步骤可能会因您的研究目的、生物分子类型和实验条件而有所不同。因此,在进行标记实验之前,最好查阅相关文献或与同事进行讨论,以确保您的实验设计和步骤是最适合您的研究的。

Cy5-ConcanavalinA
Cy3-Concanavalin A
ICG-Dextran
SiR-PEG4-Maleimide
FITC-PEG-OH
Sulfo-CY7 alkyne
5-FAM tetrazine
5-FAM Maleimide

【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于实验室环境)

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