水样病毒核酸提取试剂如何大幅提升病毒核酸的提取得率？

产品特点

◎独特的核酸富集因子，可高效聚集病毒核酸，大幅提升病毒核酸的提取得率；

◎采用真空浓缩技术，可高效富集提取较大水样中的病毒核酸，有效解决了水体中病毒含量较低、必须富集提取的难题；

◎操作非常简单，只需20多分钟即可完成病毒核酸提取，不需要剪碎滤膜，不需要调PH，不需要冗长的振荡破碎，有效降低操作者病毒接触感染的风险。

产品介绍

水体中病毒核酸的提取一直是个难题，主要原因有二：①水体中病毒含量较低，必须富集才能提取到足量检测的病毒核酸；②病毒本体较小，无法通过微孔滤膜过滤截取。百代生物经长期研发，研发成功了专门提取水体样本中病毒核酸的富集提取试剂盒，有效解决了病毒核酸提取的上述难题。试剂盒配置独特配方的病毒裂解液，可快速裂解病毒本体，充分释放病毒核酸，核酸富集因子可使释放出来的病毒核酸聚集在一起，大幅提升病毒核酸的提取得率。试剂盒配套BIOG便携式真空装置使用，采用美国实验室进口的高效核酸吸附膜，可高效富集提取较大量水样中的病毒核酸，有效解决了水体病毒含量较少、必须富集提取的难题。BIOG水样病毒核酸提取试剂盒操作非常简单，只需20多分钟即可将病毒核酸提取完毕，中间无滤膜剪碎步骤，不需要调PH，不需要冗长的振荡破碎，不仅可大量节约研究者的操作时间还可有效降低操作人员病毒接触感染的风险。提取的病毒核酸纯度高，无腐殖质、多糖、蛋白、色素等污染，可直接应用于PCR、RT-PCR、荧光定量RT-PCR、测序和分子杂交等。

操作步骤

1. 请自行准备：无水乙醇、异丙醇、50mL洁净烧杯、1.5mL无RNA酶离心管、50mL一次性无菌注射器。

2. 取出洗涤液，按终浓度70%的比例加入无水乙醇，如3mL加入7mL无水乙醇；15mL加入35mL无水乙醇，充分混匀。

3. 取50mL洁净烧杯1只，加入10mL预处理过的水样，再加入0.5mL核酸富集因子、5mL病毒裂解液及50μL 消化液，搅拌混匀，65℃放置15分钟。

4. 取出烧杯，自然冷却到室温，加入15mL异丙醇，搅拌混匀。

5. 将富集吸附柱放在抽滤装置上，再将50mL无菌注射器针筒插入富集吸附柱上端，将上述溶液全部转入针筒内，静置2 分钟，真空抽滤至富集吸附柱内液体刚刚抽滤完毕（注意不要抽滤太干，太干不利于后续步骤开展）。

6. 向针筒内加入1mL 洗涤液，静置2分钟，真空抽滤至富集吸附柱内液体刚刚抽滤完毕（注意不要抽滤太干，太干不利于后续步骤开展）。

7. 向针筒内加入0.5mL 洗涤液，静置2分钟，抽滤2 分钟。

8. 按每份样本20μL 取洗脱液（如10份提取样本，即取200μL 洗脱液），放置于1.5mL无RNA酶离心管，65℃预热。

9. 将富集吸附柱放入收集管内，12,000 rpm 常温离心3分钟，离去残留的洗涤液。

10. 取出富集吸附柱，放入新的1.5mL无RNA酶离心管内，加入20 μL 上述预热的洗脱液，静置2分钟，12,000 rpm常温离心2 分钟，收集核酸溶液。提取的核酸即可用于下一步实验或-70℃保存。

特别说明：1.本试剂盒配套BIOG真空核酸提取装置使用，单次可提取10mL之内量的水样病毒核酸，研究者也可根据实验需要进行多次抽滤，提取更大量的水样；2、比较洁净的水样如饮用水、泳池水、水库水、海水等可直接进行病毒核酸提取，污染水体或杂质较多的水体应进行预过滤，以除去较大的颗粒物，可以使用研究者已有的水样预处理装置，也可使用BIOG水样过滤器；3、洗涤液最好现用现配，按需计算用量后配制；4、为防RNA酶污染，实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩，使用处理过的无RNA酶的容器和无RNA酶的超纯水；5、提取的核酸如暂不使用，应-70℃保存，可适当加入RNA保护因子（货号：51090，一般20μLRNA溶液加入1μL）；6、本试剂主要用于提取水样病毒核酸，也可用于提取水样细菌核酸，但不适于提取细胞壁较厚的真菌和其它生物的核酸。