miRDeep分析microRNA测序数据流程

microRNA的分析过程:
microRNA测序数据分析选用软件miRDeep,关于这个软件,有文章:
Discovering microRNAs from deep sequencing data using miRDeep,Nature Biotechnology 26, 407 - 415 (2008)  
引用次数:251次 
链接:http://www.nature.com/nbt/journal/v26/n4/abs/nbt1394.html

分析流程如下:
第一步 去接头!如果你的测序数据是等长的,远大于microRNA的长度18~26的话,那肯定没去过接头)
$  mapper.pl filedhijkfile−d−h−i−j−kadapter -l 18 -m -s $file.collapsed
第二步 回贴  将去过接头的reads回贴回参考基因组
mapper.plmapper.plfile.collapsed -c -p genometgenome−tfile.aln
第三步 鉴定miRNA  已知的miRNA或是新的miRNA都会被鉴定出来,而且表达量也会报出
miRDeep2.plmiRDeep2.plfile.collapsed genome.fagenome.fafile.aln mature.famature.fahomology.mature.fa pre.fatpre.fa−tspecies.name -c 2>$file.report.log
第四步  如果你有一个miRNA的集合 先跳过第三步直接做定量的话

quantifier.plpquantifier.pl−ppre.fa -m mature.fa.rmature.fa.−rfile.collapsed -U &

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