1.QIIME 安装(virtualbox安装)

开始之前你需要知道的知识

16S 测序

16S rRNA基因是编码原核生物核糖体小亚基的基因,长度约为1542bp,其分子大小适中,突变率小,是细菌系统分类学研究中最常用和最有用的标志。

其序列包含可变区(Variable region)和保守区(Constant region)。可变区序列因细菌而异,且变异程度与细菌的系统发育密切相关,通过提取环境样品的DNA,并扩增和检测其中的一段或几段区域,可以了解环境样品(土壤、肠道、海洋)中细菌的分类和丰度。

OTU(Operational Taxonomic Units)

如果序列之间,比如不同的16S rRNA序列的相似性高于97%就可以把它定义为一个OTU,每个OTU对应一个不同的16S rRNA序列,也就是每个OTU对应于一个不同的细菌(微生物)种。通过OTU分析,就可以知道样品中的微生物多样性和不同微生物的丰度。

测序区域

由于16S rDNA较长(1.5kb),考虑到测序平台的读长限制,我们只能对可变区进行测序。16S rDNA包含有9个可变区,分别是v1-v9.一般我们对v3,v3-v4和v6可变区域进行扩增和测序。

v3,v3-v4和v6区域是比较常用的区域,可以查看一些文章或者其他一些公司的报道,有些可能会把v5-v6作为测序区域,或者是选择v1-v3作为测序区域。


QIIME

接下来部分是属于QIIME2在Windows下的安装步骤

QIIME2安装

参考文档 官网地址:qiime2doc 上面的链接是QIIME2的官网,QIIME(第一个版本)已经不推荐使用了

QIIME 2 has succeeded QIIME 1 as of January 1, 2018. QIIME 1 is no longer supported at this time,as development and support effort for QIIME is now focused entirely on QIIME 2. For more information, see our blog post: QIIME 2 has succeeded QIIME 1 QIIME 1 users should transition from QIIME 1 to QIIME 2. If you're new to QIIME, you should start by learning QIIME 2, not QIIME 1

从2018年1月1日起,QIIME2已经取代了QIIME,官方推荐用户应该从QIIME过渡到QIIME2,新手也应该从QIIME2开始。

安装VirtualBox

第一步:你需要安装VirtualBox

QIIME2并不支持Windows,所以为了能在Windows平台下使用QIIME2,事先要先安装虚拟机(VirtualBox),目前VirtualBox最新版本是6.0.0。选择Windows hosts然后下载文件。

1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第1张图片
VirtualBox官网下载地址

然后一步一步点击安装,很快就可以安装成功,VirtualBox界面如图所示:

1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第2张图片
VirtualBox界面

此图演示版本为:5.2.22 r126460 (Qt5.6.2)

准备好Ubuntu镜像

第二步:你需要下载好Ubuntu镜像

现在Ubuntu的版本是18.04 LTS,大家可以去官网免费下载,点击Download即可下载。

1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第3张图片
Ubuntu官网下载地址

Ubuntu 18.04大小为18.1G,所以你需要等待一阵子。

创建虚拟机

在VirtualBox创建Ubuntu虚拟机

当工具和镜像准备好的时候,你就可以在VirtualBox创建一个虚拟机了,接下来使虚拟机创建过程的演示。

  1. 点击新建,填写信息

    1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第4张图片
名称:这里是Ubuntu,自己可以随意取

类型:这里选择Linux

版本:Ubuntu(64-bit)

填好信息之后点击下一步。
  1. 设置内存大小

    1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第5张图片
这里根据自己的电脑进行设置,只要在绿色区域之内就没多大问题,然后下一步。
  1. 创建虚拟硬盘

    1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第6张图片
选择现在创建虚拟硬盘
  1. 选择类型

    1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第7张图片
选择类型为VDI
  1. 选择硬盘容量类型

    1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第8张图片
选择动态分配
  1. 设置硬盘路径和大小

    1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第9张图片
选择好硬盘存储路径和大小,这里是E:\linux\Ubuntu.vdi和40GB,可以根据需要修改,最后点击创建就可成功创建虚拟机。
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第10张图片
现在可以看得到虚拟机的各种详细信息。

在虚拟机内安装系统

现在我们已经有了虚拟机,不过这个虚拟机没有操作系统,就像现实中出厂的计算机一样,是一个裸机。目前要做的事情就是把虚拟机当做真实的机器那样,给它安装一个操作系统。

给虚拟安装操作系统需要用到我们前面已经准备好的Ubuntu镜像,我们要利用Ubuntu镜像来安装系统,接下来是Ubuntu的安装过程。

  1. 虚拟机内设置启动盘

    点击设置,选择存储,然后点击控制器:IDE下方的没有盘片。

    1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第11张图片
接下来点击右边属性栏目的光盘图标,它会展开一个选项,选择**选择一个虚拟光盘文件**
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第12张图片
弹出一个对话框,这时候你需要找到Ubuntu镜像的位置,这边是在D盘:
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第13张图片
当你找到你的镜像的时候,点击**打开**就可以了,最后再点击**OK**
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第14张图片
你可以看到虚拟机的信息发生了变化
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第15张图片
做好这些工作之后,点击左上角的**启动**即可开始安装程序。
  1. 安装选择

    当你点击开始的时候,由于虚拟机已经现实的机器不同,可能会出现几个选项让你选择,这个时候只要选择有install Ubuntu的选项就行了,这个时候的画面如图所示:

    1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第16张图片
1.  选择语言为简体中文,单击安装Ubuntu
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第17张图片
2.  选择键盘布局为汉语
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第18张图片
3.  选择正常安装,勾选第三个选项
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第19张图片
4.  选择清除整个磁盘并安装Ubuntu
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第20张图片

因为这是虚拟机,还没操作系统,所以可以选择第一个选项,假如是真实的机器,并且已经有操作系统了,那你可以选择和XXX系统共存或者其他选项。

    然后确定更改
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第21张图片
5.  选择时区为shanghai
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第22张图片
6.  设置好用户名和密码以及计算机名称
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第23张图片
    接下来就是系统自动安装的过程,你需要等待一会儿。
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第24张图片
     最后安装好之后重启:
1.QIIME 安装(virtualbox安装)_第25张图片

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