免疫组化IPP分析

背景

1.图片来源。DAB显色的免疫组化图片

2.输出的结果。

统计用的结果是density（mean）

3.光密度（OD）反映蛋白的量。

灰度值：黑0----白255。

步骤

1.光密度校正。具体步骤很容易查到。

2.设置测量参数。 area 和IOD

面积过滤值=100

显示选项中：

 NO fill holes， smooth=2， 

选area 和IOD

如图设置

3.保存测量环境文件

4.手工描绘测量区域

5.选择色彩。选择HSI

H:0-29

S:不动

I:MAX=光密度校正的背景值相同（靠近255一端）

根据图片的显色，可以适当微调HSI

最后保存选色文件。file-save-

6.设置数据收集器

image----name

count/size----area(---sum) and  IOD(---sum)

7.测量

测量选择区域面积：edit-count aoi to objects

在data collector中读取测量数据

然后，delete 测量

重新点AOI自主描绘窗口工具，之前画的框就会自动出现

点击count---在data collector中读取测量数据

小IOD除以大Area.=平均光密度值

8.数据整理

同一样品不同视野的结果取均值=一份样品的结果

同一处理组的不同样品的结果进行统计分析。

注意事项

1.图片的拍摄条件不能变。相同光亮，相同放大倍数，相同曝光条件。

2.不能使用自动拍照功能，必须手动拍照。

3.曝光条件。将空白区域调整到视野中央，通过曝光，使灰度值在230左右，然后校正白平衡，使它显示纯白色。

资料来源链接：免疫组化Image pro plus