紫玉Cassie
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科研小兵～记首次化转成果

科研小兵～记首次化转成果_第1张图片
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第一次自己做化转，虽然转的是空载进感受态细胞，但也是胆战心惊，不知道能否成功，向来马虎的我每一步做的都很细致认真，按照实验操作步骤慢慢来，然而第二天早上来看我的抗性平板，长成了这个鬼样子，害怕不成功的我居然做成功了！虽然有点密集。。。。

回顾一下实验操作步骤，由于质粒是购买的，2ug质粒干粉，离心后加入20ulddH2O，终浓度为0.1ug/ul，也就是100ng/ul。首先将2ul，即200ng质粒加入到100ul感受态细胞中，枪头轻轻混匀，冰上静置30min。42℃水浴热激45s，冰上冷却2～3min。加入LB900ul无抗LB复苏，液培1h(220rpm)。涂Amp+抗性平板12～16h。

次日将长出的单克隆挑出，在Amp+抗性平板上划线（可保留一个月），用10ml含有Amp+的玻璃试管LB培养基摇菌，用于质粒提取实验。

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