制备跑胶的系列步骤
一、常用培养基
1、LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨10g ，酵母提取物5g ，氯化钠10g 如果需要用1NNaOH(～1ml)调整pH至7.0，再补足水至1L。 注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
2、SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g，酵母提取物5g，氯化钠0.5g，1mol/L氯化钾2.5ml 用水 补足体积到1L。分成100ml的小份，高压灭菌。 培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
3、SOC培养基 成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭 过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到 100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌)。
4、TB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨12g 酵母提取物24g 甘油4ml 各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4 /0.72mol/LK2HPO4 的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。高压灭菌或用 0.22um的滤膜过滤除菌)。
5、2×YT培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨16g ，酵母提取物10g ，氯化钠4ml 如果需要用1NNaOH(～1ml)调整pH至7.0，再补足水至1L。 注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
6、YPD培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨20g， 酵母提取物10g ，葡萄糖20g 用水补足体积为1L后，高压灭菌。建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加 1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g 琼脂粉。
二、常用抗生素 氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml) 氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml) 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小1，份于-20℃贮存。 常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
1，羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以 25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
2， 甲氧西林(methicillin)(100mg/ml) 溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终 浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
3， 卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml) 溶解0.1g卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以 10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
4，氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml) 溶解0.25g氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以 12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
5， 链霉素(streptomycin)(50mg/ml) 溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以 10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
6， 萘啶酮酸(nalidixicacid)(5mg/ml) 溶解0.05g萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。
7， 四环素(tetracyyline)(10mg/ml) 溶解0.1g四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成 小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长 培养基。
小技巧：如配制10mg/ml卡那霉素，先在盐水瓶或血清瓶加入10ml双蒸水，高压，冷却后加入0.1g 卡那霉素，混匀，滤膜过滤到试管中，再以1ml/管分装到EP管中待用。
制备跑胶的系列步骤
配制TBE buffer： 倒入100ml TBE 进入1.9L 纯净水中，摇匀即可。这个需要倒 进跑胶台子里面，同时用于下面。
配制1% Agr 胶：
1. 称重2g Agr粉放入200ml TBE中
2. 微波炉2分钟，融化充分放在温水中浴，标记上姓名和日期
3. 需要用的时候在拿出来，否则会凝固。（大概可以用5次）
------
制作玻璃跑胶平板
1. 在小烧杯里放入3 μL Red Safe dye（冰箱里锡纸包） + 10 mL 1% Agr gel 2. 放好夹子一定要平行，Loading在玻璃片上，平稳20分钟。
跑胶：
1. 注进6μL marker 在第一个轨道，
2. 接下来6μL sample 在依次其他轨道，比例是： 3. 1 μL loading dye + 5 μL plasmids/ DNA production 4. 120V for 30 分钟。
读结果： 1. 四楼电脑室 用户名密码进入机器 2. 打开机器2个门，一定带手套 3. 把胶从玻璃片上移下来，放在中间 4. 鼠标选择：Quantity one- basic- select scammer- 5. 机器上选择EPI-WHITE —TRANS UV 6. Auto expose，Up/down， 7. Save -expose USB， 8. 下载image J，google下载Mac 9. Colour balance 去调整颜色，分析结果 10. DNA log DNA ladder