如何避免血清中的沉淀?

用于细胞培养的胎牛血清以及其他血清中可能会存在以下种类的沉淀物：

1. 纤维蛋白：它是经常出现的较大的沉淀物，可以达到1-2mm，可以用肉眼观察到。因为血清都是在低温下进行收集和快速处理的，一些纤维蛋白原（可溶性的形成絮状纤维蛋白的前体）在处理过程中仍然处于溶解状态，当经过最后的过滤分装后，就会在瓶中凝结出现纤维蛋白沉淀。

2. 磷酸钙：它也是常见的一种沉淀物，通常会使血清出现浑浊，并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点，这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动，因此经常被误认为是微生物污染。

3. 胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质。他们也是血清中出现沉淀物的常见原因。

最常见的沉淀物，就是在血清融化过程中有时候会出现的沉淀，血清中包含絮状沉淀是沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。要除去沉淀，离心血清（400g，1-2分钟）或者简单的让其沉淀在瓶子底部，将血清小心的转移到另一个无菌瓶里（一般不建议采用过滤的方法除去沉淀，因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤）。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以，使用产品时要摇动并加热血清至37℃，沉淀会自然消失。

按如下操作可避免沉淀的产生：

（1）解冻血清/分装冻存时，须规则摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。

（2）勿将血清置于37℃太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到破坏，从而影响血清的品质。

（3）血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

血清出现沉淀是血清的正常特性，各大品牌的血清均有沉淀的出现，海星生物根据细胞培养多年经验，血清沉淀的多少与血清的使用效果没有必然关系。建议更换新批次血清的时候，取少量细胞进行测试培养，以确定是否影响后续细胞生长。

沉淀不是检验血清的硬指标，但为了实验准确、实验美观、实验便利，还是应该尽量减少沉淀的产生。掌握正确的血清解冻、使用方法，再加上一款品质稳定的优秀血清，对于细胞实验来说，至关重要。