流感病毒提取步骤

流感病毒核酸提取可以用 BIOG 拭子核酸提取来做

操作步骤

(请自备:无水乙醇、1.5mL灭菌离心管)

1. 取出洗涤液,按70%比例加入无水乙醇,如3mL加入7 mL无水乙醇,9mL加入21 mL无水乙醇,混匀。

2. 取1.5mL灭菌离心管1支,加入200 μL裂解液、20μL消化液D、4μL溶液A及100μL拭子涮洗液,充分温和振荡混匀,56℃水浴8 min。

3. 取出离心管,加入350μL无水乙醇,轻轻颠倒混匀6次。 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,静置1min,12,000 rpm 离心1min,弃收集管内废液。

4. 将吸附柱放回收集管内,加500 μL洗涤液至吸附柱内,12,000 rpm 离心2min,弃收集管内废液。

5. 取出吸附柱,放入新的1.5 mL灭菌离心管内,加入50 μL洗脱液,12,000 rpm 离心1min,收集DNA溶液。提取得到的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。


注意事项:

1.BIOG 拭子涮洗液制备:向1.5mL离心管中加入800μL生理盐水,将拭子收集的样本置于生理盐水中,涮洗20秒,使细胞完全脱落,贴离心管壁挤干拭子上的液体,12,000 rpm 离心5 min,弃700 μL上清,剩余100μL上清,充分振荡混匀。

2. 洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。

3. 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象,置于37℃水浴中溶解即可。

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