microRNA提取步骤

一、BIOG特点

1、操作简便快速，可在 30 分钟内获得理想的 RNA，适用于一次处理较多样本的批量提取；

2、提取 RNA 纯度高，无抑制剂，A260/A280 为 1.8-2.0；

3、采用自主研发的改性硅基磁珠，同样的样本量提取的 RNA 更多；

4、可用于小量（200μL）血清、血浆、胸腹水、脑脊液、滑膜液、水样等液体样本中游离 RNA 的提取；

二、 microRNA 血清/ 血浆 BIOG操作步骤

1. 请自行准备：无水乙醇、异丙醇、1.5mL 去 RNA 酶离心管。

2. 取出洗涤液，按 70%比例加入无水乙醇，如 6mL 加入 14 mL 无水乙醇，12mL 加入 28 mL 无水乙醇，混匀。

3. 取 1.5mL 去 RNA 酶离心管，加入 200μL 裂解液、20μL 消化液、4μL Carrier，再加入 200μL 样本，振荡混匀，58℃温育 10 分钟。

4. 取出离心管，冷却到室温，加入 300μL 异丙醇，充分混匀，再加入 20μL 磁珠复合液（每次使用前须充分混匀），振荡混匀 3min（注意不

要颠倒混匀，以防磁珠粘附于管盖内壁），静置 2min。

5. 将离心管置于磁力架上放置约 20s 至磁珠完全吸附，开盖，彻底吸弃上清液（注意枪头不要接触磁珠）。

6. 加入 800μL 配制后的洗涤液，将离心管从磁力架上取下，充分振荡 2min，确保磁珠完全分散。将离心管置于磁力架上放置约 20s 至磁珠

完全吸附，开盖，吸弃上清液（注意枪头不要接触磁珠）。

7. 将离心管从磁力架上取下，开盖，干燥约 3-5min，至无明显乙醇气味。

8. 加入 50 μL 洗脱液，振荡至磁珠充分散开，室温静置 2min，振荡混匀 2min。

9. 将离心管置于磁力架上，待磁珠完全吸附后，小心吸取上清液至一新的 1.5mL 去 RNA 酶离心管中，提取的核酸可直接用于下游实验，或

-70℃保存备用。

三、注意事项：

1. 为防 RNA 酶污染，实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩，使用处理过的无 RNA 酶的容器和无 RNA 酶的超纯水。提取的 RNA 溶液

可适当加入 RNA 保护因子（货号：51090，一般 50μLRNA 溶液加入 2μL）。

2. 2.裂解液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻，洗涤液在使用前应加入乙醇后充分混匀。