SnapGene软件设计单片段同源重组引物

在同源重组酶的作用下，通过识别目的片段上带有的载体末端同源序列，将目的基因和载体连接起来，再导入宿主细胞中，实现目的基因在宿主细胞内的正确表达。

SnapGene界面.png

1. 标记目的基因（上游2000bp的5'UTR和下游2000bp的3'UTR）

5'UTR-Pex5-3'UTR.png

2. 5'UTR和3'UTR片段扩增引物设计（产物大小1000-1500bp）

Actions→ PCR → Select PCR product

PCR引物设计.png

3. NEBuilder HiFi DNA Assembly 模拟克隆

Actions→NEBuilder HiFi DNA Assembly→Insert Fragment
Vector：选择线性化方式（限制性内切酶）
Fragment：选择F和R引物

质粒模拟.png