如何从干血斑中提取高质量的基因组DNA？

操作步骤

1. 请自行准备：无水乙醇、1.5ml 离心管。

2. 取出洗涤液 A 和洗涤液 B，按以下操作：

a) 洗涤液 A：7mL 加入 3mL 无水乙醇；14mL 加入 6mL 无水乙醇，混匀。

b) 洗涤液 B：3mL 加入 7mL 无水乙醇；6mL 加入 14mL 无水乙醇，混匀。

3. 取 1.5ml 灭菌离心管 1 支，加入 200 μL 裂解液和 20μL 消化液，振荡混匀，再加入 3-6 片直径 6mm 干血斑，300rpm 振荡 8-12 分钟，至干血斑滤纸片变白，再 65℃孵育 10 分钟。

4. 取出离心管，室温放置 2 分钟，弃去滤纸片。加入 500μL 无水乙醇，振荡混匀。

5. 将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，12,000 rpm 离心 1 分钟，弃收集管内废液。

6. 将吸附柱放回收集管内，加 500 μL 洗涤液 A 至吸附柱内，静置 2 分钟，12,000 rpm 离心 1 分钟，弃收集管内废液。

7. 将吸附柱放回收集管内，加 500 μL 洗涤液 B 至吸附柱内，静置 2 分钟，12,000 rpm 离心 1 分钟，弃收集管内废液。

8. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 离心 3 分钟，离去残留的洗涤液。

9. 取出吸附柱，放入新的 1.5 mL 离心管内，加入 20 μL 洗脱液，静置 2 分钟，12,000 rpm 离心 2 分钟，收集 DNA 溶液。提取得到的 DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。

注意事项：

1、此处推荐的血斑血量约为 50-200μL，血量过少或过多，应适当减少或增加试剂量。

2、析出液、洗涤液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗。

3、裂解液如有白色絮状物析出属正常现象，置于 37℃水浴中溶解即可。