一抗和二抗有什么区别？

抗体是在抗原的刺激下由B细胞增殖分化为浆细胞后所分泌的一种免疫球蛋白，可以特异性结合抗原。在实验当中，根据其结合能力和用途分为一抗和二抗，那么你知道一抗和二抗有什么区别以及在实验中如何选择吗？

一抗（primary antibody）作为一种免疫球蛋白，能够特异性结合特定蛋白并将其纯化、检测和定量。使用小鼠、大鼠、山羊、兔子及其他动物作为寄主，可将一抗培育成多克隆抗体（pAb）或单克隆抗体（mAb）。

1.实验种属和类型的确定

1）明确实验中的样本种属：如人、鼠、兔等，应该选择物种相同或有交叉反应的抗体。

2）明确实验类型：如WB、ELISA、IHC、ICC、FCM分析等，一般抗体说明书会明确说明该抗体经试验验证适用或不适用于何种分析类型，如未提及也并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型，而是说明尚未经过此种分析试验验证。

2.抗体的类型

1）单克隆抗体：由单一B淋巴细胞分泌产生的仅识别某一特定抗原表位的、高度均一的抗体。单抗实验过程中可产生极少或无背景染色，同时也可减少与非目的蛋白的交叉反应。

2）多克隆抗体：由多个B细胞克隆产生，针对于抗原几个表位的多种抗体混合物。多抗可识别出抗原的微小变异，能产生更强大的抗原检测信号，是涉及变性蛋白质实验首选抗体。

二抗（secondary antibody）可以直接和与靶抗原连接的一抗结合。在一抗与抗原结合后，标记的二抗特异性的结合一抗的Fc端。利用这种相互作用可以使二抗间接地进行检测和纯化靶蛋白（抗原）。

1.种属来源

一般会根据一抗的种属来源来选择相应的抗该物种的二抗。比如：一抗是小鼠源的单克隆抗体，二抗则应该是抗小鼠的二抗（山羊或是兔抗小鼠）。

2.抗体亚型

多克隆抗体一般主要是IgG类免疫球蛋白，相应的二抗为抗IgG抗体；单克隆抗体由于存在不同的亚型和类别，选择二抗时需要根据一抗的类型或亚类相匹配。

二抗又分为完整抗体和抗体片段两种，根据实验来决定使用哪种，主要包括IgG分子完整抗体、Fab片段以及F(ab’)2片段。

以上就是一抗和二抗有什么区别，你学会了吗？