Western Blot半干转

1. 半干转液

Abcam公司 General western blot protocol 推荐使用0.04%SDS半干转液。

成分	浓度	整理后浓度
Trisbase	48mM	5.8g/L
Glycine	39mM	2.9g/L
Methanol	20%	200ml/L
SDS	0.04%	0.4g/L

小分子量蛋白如内参β-actin使用无SDS的即可，加SDS容易转过。
大分子量可将SDS浓度调至0.1%。

2. 半干转条件
   
   半干转条件
   
   表面积根据阳极滤纸面积计算得来，与滤纸上的胶数量无关。
   使用恒流模式半干转。

电流密度	时间
0.8 mA/cm2	1-2h
1.2 mA/cm2	1h
2.5 mA/cm2	30-45min
4.0 mA/cm2	10-30min

• 更多资料
  Abcam: General Western Blot Protocol
  Sigma: Western Blotting Protocol