血浆DNA中量富集提取试剂简介

一、产品简介：

BIOG游离DNA富集提取试剂盒是常州百代生物科技股份有限公司研制的专门用于提取较大量液体样本中低浓度DNA的富集提取试剂盒。血清、血浆等液体样本中游离DNA的高效提取一直是个难题，由于提取原理上的缺陷，磁珠法的提取富集度和灵敏度远不如离心柱法，而即使是离心柱法，目前也存在富集倍数偏低的问题。使用较小的样本量，如目前常用的0.2 -0.3ml，则提取的DNA量少，洗脱液DNA浓度较低，无法满足一些实验的要求。如果加大样本量，就要用较大的离心柱，使用较大体积的洗脱液，较大功率的离心机，虽然提取的DNA绝对量多了，但洗脱液中DNA浓度仍然较低。BIOG游离DNA富集提取试剂盒配套BIOG便携式真空装置，采用美国实验室进口的高效硅基DNA吸附膜，可高效富集提取液体样本中的低丰度DNA，使DNA的提取量和提取浓度得以大幅提升，较普通试剂盒的提取浓度大幅提升3倍以上，有效解决了因洗脱液中DNA浓度过低无法进一步分析的问题，如基因克隆、基因检测、微生物核酸检测、测序等。试剂盒适用样本类型广，包括血清、血浆、胸腹水、脑脊液、尿液、水样等几乎所有的生物液体样本。其中，血清、血浆、腹水的提取量为0.3-1.5ml，尿液的提取量为2-10ml，水样的提取量为5-18ml。特别地，BIOG cfDNA Enri提取的DNA终浓度高，有效克服了一般试剂盒样本量大、洗脱液多、DNA提取终浓度依然较低的缺点。试剂盒提取体系经多次优化，提取DNA纯度高，可广泛用于各种PCR、荧光定量PCR、测序和分子杂交等。

二、产品特点：

◎采用真空浓缩技术，高效富集提取液体样本中的低浓度DNA，使DNA的提取量、特别是提取浓度较普通试剂盒大幅提升3倍以上，有效解决了因DNA浓度较低无法进一步分析和对靶基因进行检测的问题；

◎提取DNA纯度高，无抑制剂，提取的DNA可用于各种PCR、荧光定量PCR、测序和分子杂交等；

◎适用样本类型广，可高效富集提取血清、血浆、胸腹水、脑脊液、尿液、水样等液体样本中的DNA。

三、比较研究：

质粒DNA回收实验：取1支1.5ml离心管，加入1ml健康人血浆样本，再加入40ul 0.5x10-8ug/ul的小鼠GAPDH质粒溶液，混匀。用BIOG游离DNA富集提取试剂盒提取1ml血浆样本DNA，40ul TE液洗脱，取提取的血浆DNA和小鼠GAPDH 质粒溶液，qPCR检测，检测CT值分别为CT1=30.95 、CT2=30.86 、 CT3=31.25 、 CT4=31.38，表明血浆DNA提取回收效率较高，富集性能卓越。

与国际某知名品牌Q比较，取2支1.5ml离心管，1支加入200ul 乙肝病人血浆样本，1支加入1ml乙肝病人血浆样本。按Q公司血浆提取说明书，提取200 ul血浆样本DNA，用BIOG游离DNA富集提取试剂盒提取1ml血浆样本DNA，分别用40ul TE液洗脱，qPCR检测，BIOG富集试剂盒提取DNA检测CT值为32.08 而Q公司试剂盒提取的DNA检测CT值为34.32。可见，BIOG血浆DNA中量富集提取试剂盒具有卓越的富集提取性能，非常适合于一些靶基因含量较低的样本或较弱阳性的样本DNA提取。

图1 取1ml健康人血浆，加入40ul 0.5x10-8ug/ul的小鼠GAPDH质粒40ul,BIOG cfDNA Enri Kit提取，40ulTE洗脱，与小鼠GAPDH质粒溶液一起做qPCR检测，CT值分别为CT1=30.95、 CT2=30.86、 CT3=31.25、 CT4=31.38，表明血浆DNA提取回收效率较高，富集性能卓越。

图2 BIOG cfDNA Enri Kit提取1ml乙肝病人血浆DNA，与Q公司试剂盒提取200ul血浆DNA qPCR检测结果，结果相差2个CT值以上，表明BIOG cfDNA Enri Kit具有卓越的血浆DNA富集提取性能。