Worthington丨艾美捷Worthington乙醇脱氢酶研究方案

源自酵母的醇脱氢酶是一种金属酶，每个分子含有四个紧密结合的锌原子（Vallee and Hoch, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 41, 327, 1955）。乙醇酶促氧化的最佳 pH 值为 8.6-9.0，乙醛还原的最佳 pH 值接近 7.0。

醇脱氢酶 (ADH) 是氧化还原酶家族的一部分，它使用 NAD +或 NADP +作为电子受体来催化醇的氧化（White and White 1997）。该反应是可逆的，底物可以是各种伯醇或仲醇以及半缩醛。酒精脱氢酶存在于大多数生物体中，酵母是酶的最活跃形式。以下数据适用于面包酵母、酿酒酵母的酒精脱氢酶。

稳定性/储存：在 2-8°C 下稳定 3-5 个月。

单位定义：

在 25°C、pH 8.8 条件下，一个单位每分钟可减少 1 微摩尔 NAD。

艾美捷Worthington乙醇脱氢酶特异性：

酵母 ADH 的特异性比肝酶的特异性更窄。它接受乙醇，对直链伯醇有一定的活性。它对某些仲醇和支链醇的作用非常有限（Dickinson 和 Dalziel 1967a）。

 

艾美捷Worthington乙醇脱氢酶应用：

伯醇和醛的酶法测定

手性化合物的合成

缩醛磷脂酶的分光光度测定

有机溶剂中的酶催化

NAD +、NADH、NADP +和 NADPH的研究

CATH分类：

类别：阿尔法贝塔

架构：Alpha-Beta 复合体和 3 层 (aba) 三明治

拓扑：醌氧化还原酶；链 A，域 1 和罗斯曼折叠

分子量：

146.8 kDa（理论值）

X佳 pH：

5.4（肖尔和 Theorell 1966）

消光系数：

189,320 cm -1 M -1（理论值）

E 1%,280 = 12.89（理论值）

试剂：

0.1 M焦磷酸钠缓冲液，pH 9.2

2 M乙醇。用试剂级水将12.12 ml 95%乙醇稀释至100 ml。

直径0.025 M。注：NAD可能因盐的形式和水合程度而异。应小心使用分析等级和正确的分子量。

0.1 M磷酸盐缓冲液，pH 7.5

0.1%白蛋白（BSA）

艾美捷Worthington乙醇脱氢酶部分参考文献：

Abdallah, M. , Biellmann, J. , Cedergren-Zeppezauer, E. , Gerber, M. , Dietrich, H. , Zeppezauer, M. , Koerber, S. , MacGibbon, A. and Dunn, M.

Reaction of the Z Isomer of 4-trans-(N,N-dimethylamino)cinnaldoxime with the Liver Dehydrogenase-Oxidized Nicotinamide Dinucleotide Complex , Biochemistry 23 , 1003 , 1984

Ainslie, G. and Cleland, W.

Isotope Exchange Studies on Liver Alcohol Dehydrogenase with Cyclohexamol and Cyclohexanone as Reactants , J Biol Chem 247 , 946 , 1972

Anderson, B. and Reynolds, M.

Multiple Inhibition of Yeast Alcohol Dehydrogenase by Heterocyclic Nitrogen Bases , Arch Biochem Biophys 114 , 299 , 1965