10X空间转录组WORKFLOW

前言

记得我们在ST Pipeline||空间转录组分析流程(https://www.jianshu.com/p/7b5d145a515a)讲过,空间转录组就是把之前的单细胞的cell-gene矩阵转化为xy-gene的矩阵,在其中xy是cell的坐标。那么如何获得这个xy呢?今天让我们来看看空间转录组的一般流程吧。

1. Histology

10X空间转录组WORKFLOW_第1张图片

将准备好的新鲜冷冻组织切片放置于空间转录组芯片上。每个细胞中的RNA分子都包含着基因表达的信息。组织切片成像,以检索组织学信息。这样就可以看到一个细胞或一组细胞在组织中的位置。

2. The Array

10X空间转录组WORKFLOW_第2张图片

空间转录组芯片上含有上千个捕获的spot,这些捕获探针的 Poly-T 尾可以结合RNA分子的 Poly-A 尾。这些阵列的排列顺序就像一个棋盘,带有相同身份条形码(barcode)的探测位于同一个正方形中。这样就可以确定每个捕获探针及其结合RNA的来源。

3. Tissue Fixation

10X空间转录组WORKFLOW_第3张图片

组织切片固定。该芯片包含一个与组织切片一起成像的视觉可检测框架。这使得在后续步骤中覆盖细胞组织图像和基因表达数据成为可能。

4. Pe

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