学习小组Day7--测序知识概括--shujun

不知不觉一周都过去啦，今天已经是学习小组的最后的一天
还是先上今天的思维导图

学习小组Day7--测序知识.png

由于目前二代测序的重要地位，所以把二代测序的原理和步骤再详细的介绍一下

DNA待测文库构建

利用超声波把待测的DNA样本打断成小片段（200-500bp），在两端添加上不同的接头，构建出单链DNA文库。

Flowcell

每个Flowcell有8个channel，channel的表面都附有很多接头，这些接头能和建库过程中加在DNA片段两端的接头相互配对，所以flowcell能吸附建库后的DNA

桥式PCR扩增与变性

以Flowcell表面所固定的接头为模板，进行桥形扩增，经过不断的扩增和变性循环，最终每个DNA片段都将在各自的位置上集中成束，每一个束都含有单个DNA模板的很多分拷贝，进行这一过程的目的在于实现将碱基的信号强度放大，以达到测序所需的信号要求。

测序

测序方法采用边合成边测序的方法。向反应体系中同时添加DNA聚合酶、接头引物和带有碱基特异荧光标记的4中dNTP（3’-OH被化学方法所保护），因而每次只能添加一个dNTP，接着加入激发荧光所需的缓冲液，用激光激发荧光信号，记录并利用计算机分析将光学信号转化为测序碱基，最后加入化学试剂淬灭荧光信号并去除dNTP 3’-OH保护基团，以便能进行下一轮的测序反应。

分享一篇2017年发表于Nature的测序Review
《DNA Sequencing at 40: Past, Present and Future》

最后引用一下，三篇非常优秀的链接
测序的世界
测序发展史：150年的风雨历程
测序技术原理及常用数据格式简介

So 跟着花花和小泽老师一周的学习 nice ending (●'◡'●)