【科研】Michaelis–Menten 曲线（米氏曲线）中反应速率的计算

参考文献：Standardized assays for determining the catalytic activity and kinetics of peroxidase-like nanozymes | Nature Protocols

SCI-Hub链接：

https://sci-hub.se/10.1038/s41596-018-0001-1 

科研需要，需要绘制所制备纳米酶的Michaelis–Menten 曲线，身边没有师兄师姐做过，只能自己摸索，国内网站上的资料不是太多，很难找到成体系的文章，同时也看到网络上有很多小伙伴遇到和我一样的困惑，不知道Michaelis–Menten 曲线的纵坐标 ʋ（反应速率）是如何得到的，所以在这里记录一下我思考后的理解，如有不对请指教。

根据 朗伯比尔定律
A = εlc 
A：吸光度(由紫外分光光度计可得)， ε：摩尔吸光系数(L/(mol·cm) 即/M/cm)，l：光路长度(cm)(我的理解是比色皿的宽度？不对请指教)，c：吸光物质的浓度(mol/L)
附常用显色剂摩尔吸收系数：

TMB	ε~652nm =39000 /M/cm
OPD	ε~417nm  =16700 /M/cm
ABTS	ε~420nm = 36000/M/cm

A，ε，l均为已知量，则 c = A/εl，
则反应速度为 ʋ =△c/△t = (△A/εl)/△t =  △A/(εl*△t) = △A/△t *(1/εl)。 若t为min，则ʋ的单位在这里为M/min，可根据数据的实际情况，将数据×10^6，将单位改成 µM/min
其中△A/△t可由该浓度下反应最开始吸光度和时间成线性的部分的斜率所得，如下图所示：

 最后，根据不同反应底物浓度对应的ʋ，得到Michaelis–Menten 曲线