末端修饰那点事

T4 PNK （T4 Polynucleotide Kinase）T4多聚核苷酸激酶的功能

激酶：利用ATP，给底物加磷酸，是磷酸化酶

磷酸酶：将底物去磷酸化，是去磷酸化酶

总结：

1：5’激酶作用（有ATP或则其它NTP前提条件下加磷酸）和磷酸酯酶作用

作用对象:在单链，双链DNA,RNA,寡核苷酸，带有3’磷酸基团的单核苷酸

作用方式：5'-OH + NTP → 5'-P + NDP，

反应可逆，在有NDP，缺失NTP时5'-P + NDP → 5'-OH + NTP(最适pH为6.4左右)，当两者都有时5'-P + NTP + NDP→5'-P + NDP + NTP

此外，补充3'-P + NTP →3'-P -P+ NDP

2： 3’磷酸酯酶作用（最适ph5.9左右,注意购买T4 PNK产品时查看是否经过修饰，即去除3’磷酸酶活性）

RNA 3'-P →3'-OH + Pi

DNA 3'-P → 3'-OH + Pi 或者3'-P-P →3'-OH + 2Pi