2022-08-10 当你细胞污染时，先不要找自己的原因

1. 多找别人的原因
   细胞老是污染，当然是要先找冻存液（刘师姐遇到过），培养皿（更换后就没事了），离心管（有人为了钓鱼，故意打开又放回去）。原因太多了，先把这些外在原因考虑一遍，再考虑自己的原因。

2. 不管是所谓的细菌，真菌，还是支原体，都是没有做好无菌原则。
   遇到细胞污染后，和细胞培养相关的所有东西，比如培养基，胰酶，离心管等都要全部换一遍。
   我自己是4种细胞，三种培养基，我自己养细胞有一个习惯，我是按照细胞种类进行准备东西的，比如293T和Cal27细胞都是用DMEM养，我还是准备两管DMEM培养基，胰酶等。从上周开始，细胞复苏时候还是可以的，只要消化扩大培养就污染，而且所有细胞种类几乎都污染了一遍。我把所用的东西全部换了一遍，一样的，复苏后48h，没有问题，扩大一下就污染。

3. 这个中间一定是有一个系统问题没有解决？
   毕竟我没有

• 不带手套，不开吹风的，就打开细胞台子（小台子是需要手动打开电源才能吹风的）里面的装PBS的瓶子，拿着从外面带进细胞房的50ml离心管
• 毕竟，我没有重感冒，连打喷嚏，还不带口罩
• 我没有打开培养箱的门时候，打喷嚏，不戴口罩
• 毕竟我没有一副手套可以用两个月那种

我做实验以前也是不戴口罩，然后去13楼找泉哥和恺神吃饭的时候，我发现他们从细胞房出来都是带着口罩的，我觉得这个习惯蛮好，所有后来我进细胞房也都戴口罩了。
我自己的手心容易出汗，直接带橡胶手套，汗液容易使得手套变黄，用了一次就会很难看，所有我都是先带一层薄膜手套，再带橡胶手套，这样外面手套一般用5到7天，就会更换新的。
移液器的问题，这学期移液器坏了很多把，我之前发过帖子，主要是容易倒吸，为了避免细胞污染，我自己在淘宝上购买了一把大龙的移液器，基本不会倒吸。
即使是这样，我的细胞还是轮着法的污染。我回想的在一个晚上，（因为白天不知道干啥去了，）当时细胞房紫外灯都照上了，我就关了细胞房紫外关了，直接打开超净台就开始做细胞实验。第二天就陆陆续续出现污染的情况。
因为我们这边的习惯，做完实验以后就把超净台照上紫外，下一个人如果看到超净台紫外关闭，说明消毒完成可以直接使用。
如果是不是亲眼所见，我是万万没想到，一个人做完细胞以后直接合上，就走了。
我看到大师姐和师弟他们每次做细胞实验前，都是在紫外灯关闭状态（以前，我认为消毒完成的装药），把自己的东西（比如带着塑料袋的培养皿，离心管）拿进去照才开始做实验。我觉得他们多次一举，而且紫外灯相当于多多工作一倍时间，也是浪费。
万万没想到，他们是对的，我是错的，而且绝不是多此一举和浪费紫外，因为污染了以后，又是好几天时间，耗不起。

4. 最后
   最后也没有答案，做好自己细胞。
   不要以为我守规矩，别人也能一样做到。
   too young，too naive

（20220810 吐槽贴，不敢在公众号发，这里知道的人少就来这里发）