兽医病理学:常见传染性病原快查

写在前面的话

本篇内容参考Cowell and Thler's第四版的细胞学,进行整理、持续补充,便于诊断的快查

【细菌】

例行性染色中,gram(+)或gram(-)的细菌,除分枝杆菌(Mycobacterium)都是蓝色至紫色。分枝杆菌(Mycobacterium)因其脂质的细胞壁,无法染上颜色。细胞内的细菌表示是活跃的细菌感染(原发性或二次性),细胞外细菌不具有特异性;单一形态的细菌群落会被认为是感染,多形态的可能是污染、正常菌群或者是混合性细菌感染

球菌

病原性球菌通常为gram+的葡萄球菌(Staphylococcus)、链球菌(Streptococcus)、消化链球菌(Peptostreptococcus)或消化球菌(Peptococcus);前两者为好氧菌,后两者为厌氧菌

噬皮线菌(Dermatophilus congolensis)会以垂直和水平方向进行分裂,形成线装。其感染表皮形成痂皮样病变。抹片应抹痂皮下病灶。


A-C细胞内外球菌,D 呈链状排列的球菌


A-D 在皮肤病灶的压片,球菌是以垂直和水平方向进行分裂,形成长链状双球菌,其形态如同火车轨道,此为嗜皮线菌的典型特征


小型杆菌/短杆菌/球杆菌

大部分的小型杆菌为阴性菌,部分细菌为双极杆菌(bipolar rod);具病原性且双极性的感觉都是阴性菌。常见的小型杆菌包括大肠杆菌(E. coli)和巴氏杆菌(Pasteurella)。在临床使用药物,可使用对gram(-)的药物应急处理,后续还是应该进行药敏试验。

A-B. 双极细菌

丝状细菌(Filamentous Rods)

造成皮肤或皮下问题的主要有土壤丝菌(Nocardia)或放线菌(Actinomyces spp.)。其他厌氧菌如细梭菌(Fusobacterium)和分枝杆菌(Mycobacterium spp.)也可能是丝状,但通常不是。显微镜下,它们外观长且细(丝状),呈浅蓝色,并且有间断的粉红色或紫色小间隔而形成“串珠样”。当看到这样的细菌时,需进行特殊培养。


典型丝状细菌


A. 猫肝脏抽吸物内的巨噬细胞,可见负染的分枝杆菌(瑞氏染色);B. 细针抽吸硬实的肺部团块,当肺巨噬细胞内出现未染上颜色的杆菌,即细胞出现的透明条纹(箭号)时,可判定为分枝杆菌感染。C. 猫肝脏的分枝杆菌。D. 猫肝脏内的分枝杆菌(抗酸染色)

大型杆菌

具有病原性且有时会引起皮肤和皮下组织感染的大型杆菌包括梭菌(Clostridia spp),以及较部常见的杆菌(Bacillus spp.)。当怀疑大型杆菌为致病原时,好氧及厌氧培养必须进行。如看到有芽孢,则可能是梭菌的感染。


A. 散布的炎症细胞、红细胞和大型产芽孢杆菌,为梭菌的典型外观;B. 为A高倍镜图片;C. 可见多个被吞噬的产芽孢杆菌;D. 犬只团块内的梭菌

偶尔在许多家畜口腔可见无病原性大型杆菌如Simonsiella spp. ,其为纵向分裂而呈水平排列,使得单一大型细菌外观如同“脚印 footprint”。如在鼻腔冲洗中发现该菌,可能有口鼻瘘管。


Simonsiella 细菌

其实以前花了很多时间纠结gram(+)的鉴别诊断,因为它们都很容易引起肉芽肿性改变。但是它们形态(前文有提及)、染色特性、常见患病动物都有很大差异。下面附几个表格是以前整理和收集的,来源不明


分枝杆菌ddx ,来自以前做的ppt

这里的acid fast弱阳性,弱抗酸,我们通常会用fite染色,好像是ph值不一样

Norcardia


gram+鉴别诊断,来自压箱底的资料,来源已忘记


续上表


酵母菌、皮霉菌、菌丝型霉菌及藻类

Schenckii 氏孢子丝菌

Schenckii氏孢子丝菌(Sporothrix schenckii)感染(孢子丝菌病,Sporotrichosis)会引发突起的增生性皮肤病变,并且经常导致溃疡。猫的病灶会有大量病原,因而诊断较为容易,但犬较难发现病原。若出现剧烈的炎症反应但未发现原因时,应进行病原培养或送病理。

Sporothrix schenckii外观为圆形至卵圆形或梭型(雪茄状),长度为3-9微米(μm),宽度有1-3μm,颜色为苍白至中等蓝色,并伴随略偏离中心的粉红色或紫色细胞核。当Sporothrix schenckii只出现少量酵母菌样菌体,或是并非典型的梭形菌体时,应和荚膜组织浆菌(Histoplasma capsulatum)区分。

Sporothrix schenckii为土壤常在菌,会引起“玫瑰园丁病”(Rose Gardener's Disease),为人畜共患病。


A. 猫只皮肤病灶,可见化脓性肉芽肿性炎症反应与大量孢子丝菌;B. 巨噬细胞内有圆形、卵圆形或梭形的孢子丝菌;C. 破裂的巨噬细胞含有许多梭形的孢子丝菌;D. 高倍镜下,猫只检体内的孢子丝菌

荚膜组织浆菌 Histoplasma capsulatum

荚膜组织浆菌主要感染肺脏,但在全身性荚膜组织浆菌感染时,也会感染其他脏器。病灶中可能会存在大量病原,可出现在细胞外,但较常被巨噬细胞吞噬,少见被中性粒细胞吞噬。荚膜组织浆菌形状为圆形或卵圆形,但不会形成梭形。直径为2-4μm,呈苍白至蓝色,具有薄且清楚的空晕及1个偏心、新月形且嗜酸性至异染色性的细胞核。


A. 肺脏抽吸检体中的巨噬细胞有大量组织浆菌;B. 猫口腔一溃疡团块的刮屑检体;C. 化脓性肉芽肿性炎症反应,巨噬细胞内有一个正在出芽的和一个圆形未出芽的组织浆菌。

皮炎芽生菌(Blastomyces dermatitidis)

皮炎芽生菌感染(芽生菌病,Blastomycosis)可能会侵犯皮肤、眼睛和内脏。芽生菌病的皮肤病灶通常发生在动物的鼻部及四肢,其大多数为溃疡或增生性病变。

皮炎芽生菌为深嗜碱性、球形,直径为8-20μm,并且有厚壁。大多数的病原为单颗出现,偶尔可见宽底出芽生殖,或是被巨噬细胞吞噬。皮炎芽生菌较大,须和新隐球菌(Cryptococcus neoformans)区分,即芽生菌具有相异的染色特性、缺乏无染色性的荚膜,以及宽底出芽生殖。与粗球霉菌(Coccidioides immitis)进行比较时,芽生菌形态较小且无内芽孢(endospore)。


A. 皮炎芽生菌在Romanowsky染色抹片下,是蓝色、球形、具有后壁的酵母样病原(箭号),其直径约为8-20μm。偶尔可见宽底的出芽。B. 淋巴结抽吸物中可见出芽的芽生菌。C. 来自犬只肺脏抽吸物的芽生菌。D. 来自犬只肺脏抽吸物的芽生菌。

新隐球菌

新隐球菌感染(隐球菌,cryptococcusis)可侵犯皮下组织,进而导致鼻部的结痂性结节病灶,但是其通常是侵犯上呼吸道和中枢神经系统。隐球菌病大多数引发肉芽肿性反应,颗粒球数目极少。在免疫抑制的动物中,炎症反应极其轻微。隐球菌外观多形性高,可能是球形至梭形,但因其具有厚且无法染上色的粘液样荚膜,通常容易辨认,但偶尔可见小型、无荚膜或粗糙型的隐球菌;若不含荚膜,其直径约为4-15μm,而包含荚膜的直径为8-40μm。在例行性血液染色中,病原呈嗜酸性至异染,也可能轻微颗粒样。荚膜一般为透明且均值,但是部分病例可能会呈淡红色。不同于芽生菌,隐球菌为细底出芽生殖,即“蜂腰出芽生殖”(wasp-waist budding)。部分新隐球菌具有人畜共患风险。


A. 可见大量隐球菌,具有透明荚膜的中形酵母菌(注意图中未见炎症反应);B. 隐球菌的窄底出芽生殖;C. 2个具有窄底出芽生殖的隐球菌;D. 脑脊液中的隐球菌;E. D图其他视野;F. 淋巴结抽吸物有大量隐球菌、1个中性粒细胞以及散布的淋巴球和红血球。

粗球霉菌(Coccidiodes immitis)

粗球霉菌感染通常侵犯肺脏与骨骼,部分也可由骨骼衍生至皮肤,形成瘘管。粗球霉菌很少出现在病灶内;可见的小球体(Spherules)为大且呈蓝色或透明,直径10-200μm,具有双层轮廓及细致颗粒性原生质(Protoplasm)的球体,但因体型大而可能出现皱褶。部分较大的菌体可能会有多个直径为2-5μm的圆形内芽孢,而且有些小球体破裂后内芽孢则会掉落在细胞外。由于粗球霉菌的大小差异极大且含有内芽孢,故可与宽底出芽生殖的皮炎芽生菌区分。此为人畜共患病。


A. 低倍镜野下可见化脓性肉芽肿性炎症反应及2个大型的粗球霉菌,此病原需与芽生菌进行鉴别诊断,本病原较大且会产生孢子;B. 同A图病原的高倍视野。C. 此图可见2个粗球霉菌(箭号)有显著的大小差异。D. 含有内芽孢的大型粗球霉菌


E. 大型粗球霉菌破裂而释出内芽孢,此图亦可见小型的粗球霉菌(箭号)

马拉色菌(Malassezia canis)

犬马拉色菌(Malassezia canis)又称为厚皮症马拉色菌(Malassezia pachydermatis),是小型、无菌丝且行宽底出芽生殖的格兰仕阳性酵母菌,呈花生状,但也可能是球形或椭圆形。此病为机会致病菌,常引起犬只常见的外耳炎及马拉色菌相关性皮肤炎,足皮肤病常见于小白狗。


A. 耳拭子检体可见大量犬马拉色菌,粘附于角质化上皮细胞;B. 马拉色菌为球形,且会行宽底出芽,呈8字形(箭号)或雪人形(箭头)


皮霉菌

小芽孢菌(Microsporum)与发癣菌(Trichophyton spp.)经常引起皮肤霉菌病(Dermatophytosis)或钱癣(ringworm)。病灶通常为局部性且有痂皮、鳞屑,而且可能出现头部、脚和尾部的脱毛。皮肤霉菌病属于人畜共患病。

可使用10%氢氧化钾溶液染毛发、新甲基蓝(new methylene blue)染色的湿抹片或是例行性血液学染色的风干抹片皆可鉴定。霉菌菌丝和分节芽孢(arthrospore)会粘附在上皮细胞表面、游离在抹片背景或出现在毛干内(发癣菌属)和毛干表面(小芽孢菌属)。


A. 毛干表面可见霉菌孢子,菌丝体(mycelia)和孢子会染色呈蓝色至深蓝色,并且有薄壁透明空晕。B. 毛干上可见霉菌菌丝体和孢子;C. 高倍镜下的霉菌菌丝体。D. 此图可见霉菌菌丝体和孢子附着于上皮细胞表面及散布于抹片背景;E. 未染色抹片下的霉菌(钱癣)菌丝体和孢子。F. 与E相同的病例高倍视野

西氏鼻芽孢菌(Rhinosporidium seeberi

西氏鼻芽孢菌是引发鼻芽孢虫病(Rhinosporidiosis)的真核病原,可感染许多动物,多分布于热带。典型特征为鼻腔出现具颗粒性息肉,形态似肿瘤,可由鼻分泌物或组织压片鉴别。圆形至卵圆形,直径为7μm的孢子,在染色下为亮粉红色,内含嗜酸性球状颗粒,并且为双层的薄细胞壁所围绕。大型孢子囊(Sporangia)内有大量孢子可作为诊断依据。


A. 鼻芽孢虫病,鼻腔表皮细胞边缘可见3种不同的病原形态(黑色箭头)。图片底部的大型圆形结构为较小的孢子囊(sporangium),而且周围有许多孢子或内芽孢(蓝色箭头,当孢子或内芽孢没有展开时,其染色会较深,但展开时则是粉红色至粉紫色。此图可见小型未成熟的孢子或内芽孢(黑色箭头);B. 大量发育中的孢子或内芽孢围绕在破裂的大型孢子囊周围;C. 细胞碎片中有大量散布的孢子或内芽孢;D. 在高倍镜下,成熟孢子或内芽孢(蓝色箭头)会有厚细胞壁及嗜酸性球状体(蓝色箭头),亦可见未成熟的孢子或内芽孢、中间型(intermediate form)(黑色箭头);E. 西氏鼻芽孢菌的未成熟孢子或内芽孢;F. E图的高倍视野,可见未成熟孢子或内芽孢的细部构造,为球形的淡嗜碱性结构,内含被认为是细胞核物质的紫色区域(箭号),以及一个以上的深蓝色球形构造。

肺囊虫属(Pneumocystis

肺囊虫为肺脏的地方流行性机会性霉菌病原,可见囊体(直径5-10μm,可能含有高达8个内囊胞体,intracystic bodies)或营养体(直径1-2μm,trophic form)。数种肺囊虫都会感染动物和人类,例行性染色后易发现完整的囊体及明显的内囊胞体,但小的营养体较难观察,难于和细胞碎片区分。虽然形态似原虫,但是其实是霉菌的一种。


卡氏肺囊虫(Pneumocystis carinii)的囊体,直径约5-10μm,通常有4-8个直径约为1-2μm的内囊胞体

会形成菌丝的霉菌

在这里包括了很多霉菌,如最常见的曲霉菌,会引起肉芽肿性炎症。有些菌丝无法用染上色,因而形成负染色影像。如藻菌病(phycomycosis)是无法染上颜色,呈现嗜酸性肉芽肿性炎症反应。


霉菌菌丝


A. 原藻病可见大量圆形至卵圆形的病原(箭头),负染区域为病原的空壳;B. A的高倍视野,可见许多圆形至卵圆形的病原且有大多含有内芽孢(箭头),大多数病原周围均有薄而透明的细胞壁(箭号)

真菌也有一张以前不知道哪里搞来的表格,分享一下

之前旁听医学院的课,其实真菌也蛮有戏的,生活史也很晕,有一些是机会致病菌有一些是本人就很毒,但是资料可能不太好找,如看到合适的再丢上来

真菌鉴别表格



原虫

利什曼原虫(Leishmaniasis)

利什曼原虫可引起皮肤和皮下组织病变,引发大小不一、增厚且溃疡的皮肤炎病变。利什曼原虫小且椭圆形,大约2-4μm,其有卵圆形的淡紫色细胞核,以及特征性的小型深紫色棒状动基体(kinetoplast)。动基体与细胞核的相对位置会有差异,常位于细胞核与大量细胞质之间。动基体可用于分辨弓虫和小型酵母菌。


利什曼原虫

弓虫(Toxoplasma gondii

弓虫感染的动物常不表现出严重的临床疾病,但可能导致眼部受损;严重的病例也可导致消化道、呼吸或神经系统损伤。可在组织或体液检查中发现。速殖子(tachyzoite)呈梭状至新月状,长约2-4μm,具淡蓝色的细胞质及紫红色的细胞核。难于和犬新包虫(Neosporum caninum)的速殖子区分,可用PCR进一步区分。

犬新包虫(Neosporum caninum)

犬新包虫是一种球样寄生虫,与弓虫类似。犬大多为先天性感染且经常会致死,侵犯的组织不均特异性。


弓虫速殖子(tachyzoites)

猫胞簇虫(Cytauxzoonosis)

胞簇虫(Cytauxzoon felis)常导致猫的死亡。短尾猫是其自然宿主,可由壁虱传染给其他猫。发育中的裂殖子(merozoite)可能会出现在巨噬细胞内。在抹片中,红细胞可能会出现戒指状的胞簇虫。


胞簇虫

以上整理是作为平时工作快查的参考资料,无商业用途

之后会陆续补充,作为看书的时候的整理,大多是从砖头书里或是谷歌里捞出来的

如有错误/错别字请多包涵!

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