Chip-seq关于NSC,RSC

CCPs

首先明确下这个概念
Pearson cross -correlations,这个概念是描述正链reads mapping的密度与负链reads mapping密度的相关性

那如何计算呢?



在做Chip的时候,对于正链来说每一区段都对于着相应的reads数(注意中括号里面的数字,代表某一区段对应的reads数量)
这时候皮尔森相关性为0


我们移动100bp,这时候正负链就有一定的交叉部分了
看图中虚线部分,负链有三个区段与正链有交叉,所以中括号内的数字变为了1,4,3
此时的皮尔森相关性为0.389


类似的,我们把正负链peaks完全重合,那么此时中括号就都有非0数字了,此时的皮尔森相关性为0.831
这就是我们最终的结果
正常情况,正负链上的peak分布大小应该是差不多的,那么根据各个区段mapping的reads数,计算皮尔森相关性,来衡量正负链peak相似程度

NSC RSC


这两个概念是衡量信号相对于背景强度的

根据前面所说的,我们通过平移正负链计算CCPs的值,作图有:



横坐标为移动了多少bp,纵坐标为CCPs的值,由于移动不同bp所产生的CCPs值不同,所以画出为单峰图


那么,这幅图就分为三个部分
上面的是fragment的长度,稍微下面的是reads的长度,(大约100多bp),也就是正负链移动了大约100bp,最下面就是全部的移动了多少bp

一般来说,fragment对应的CCPs最大,最小的是最下面的那个虚线
所以正常NSC,RSC要大于1.05



如果是这样的图,fragment和min(cc)值就比较接近,这样NSC比值就小于1.05,甚至小于1
这样就是不合格的

参考:https://hbctraining.github.io/Intro-to-ChIPseq/lessons/06_combine_chipQC_and_metrics.html

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