产品特点
◎操作简便快速，可在半小时内获得理想的miRNA；
◎miRNA产量更高，较国内部分同类产品CT值小1-2个；
◎样本范围广，可广泛应用于血清、血浆、胸腹水等液体样本中miRNA的提取。
产品介绍
血清血浆中miRNA的含量较低，不易提取。BIOG血浆血清miRNA提取试剂盒采用了最新的优质进口离子膜，裂解液和洗脱液经过多次优化，能高效富集性地分离miRNA。与部分其它公司的同类产品相比，提取的miRNA产量更高，CT值可早1-2个，可直接应用于RT-PCR、Northern 杂交和测序等。
操作步骤
1. 请自行准备：无水乙醇、无RNA酶1.5mL离心管。
2. 取出洗涤液，按以下操作：
a) 洗涤液A：21mL加入9mL无水乙醇；42mL加入18mL无水乙醇，混匀。
b) 洗涤液B：18mL加入42mL无水乙醇；36mL加入84mL无水乙醇，混匀。
c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。
3. 取无RNA酶的1.5mL离心管，加入300μL样本，300μL 裂解液及30μL 消化液，充分混匀，65℃水浴10 分钟。
4. 加入0.6mL异丙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。
5. 将吸附柱放入收集管内，将600μL上述溶液转入吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液；将剩余溶液转移至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。
6. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液A至吸附柱内，静置1分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。
7. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。
8. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。
9. 按每份样本30μL 取洗脱液（如10份提取样本，即取300μL 洗脱液），放置于灭菌1.5mL离心管，65℃预热。
10. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 分钟，离去残留的洗涤液。
11. 取出吸附柱，放入新的1.5mL RNase-free灭菌离心管内，在吸附柱中心加入30 μL预热洗脱液，静置2分钟，12,000 rpm 离心1分钟，收集miRNA溶液。提取的miRNA即可用于下一步实验或-70℃保存。
注意事项
1. 为防RNA酶污染，实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩，使用处理过的无RNA酶的容器和无RNA酶的超纯水 。
2. 血清血浆中miRNA含量较低，难以用NanoDrop测量其浓度，建议直接进行RT-PCR或RT-qPCR分析。
3. 洗涤液含有刺激性化学物质，请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。
4.提取的miRNA如暂不使用，应-70℃保存，可适当加入RNA保护因子（货号：51090，一般40μLRNA溶液加入2μL）。