曹务强
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【每周文献】R蛋白切割入核-2012-NC

又看了一篇非常有趣的植物R蛋白相关文章。植物免疫中的明星基因XA21，在其识别的effector介导下，C端的kinase会被切割下来进入细胞核，和WRKY62互作，调节水稻的抗病性。有意思的是，XA21的核定位是其介导植物免疫所必需的的，如果在XA21上连接一个NES，使蛋白从核中输出，XA21就无法增强植物的抗病性了。

【每周文献】R蛋白切割入核-2012-NC_第1张图片
NC文章

背景介绍

XA21可增强水稻对黄单胞杆菌（Xoo）的抗性

XA21可识别并结合Xoo中保守的多肽AxY S22介导植物免疫反应

在前期研究中发现，在Myc-XA21转基因植物中，XA21结合AxYS22后会积累，并被切割释放一段110kD的N端蛋白

1.XA21被切割释放C段的激酶结构域

在XA21-CFP转基因植物中发现，用AxYS22处理后，有一段70kD的C端kinase domain会被切割下来

通过IP-western进一步确认，确实有一段C端被切割

2.XA21胞内kinase进入细胞核

在水稻原生质体中，没有AxYS22时，XA21-GFP定位在细胞膜，细胞质以及细胞核附近的ER上

在水稻原生质体中，当用AxYS22或Xoo提取物处理后，XA21-GFP在细胞核有明显的定位

在稳定转化株系中，荧光也显示相同的结果

在稳定转化株系中，western检测发现AxYS22处理后，70kD的C端蛋白在核中富集

XA21没有转录活性相关domain，是否和其他转录因子互作调节基因转录？

WRKY62负调控XA21介导的植物免疫

BiFC显示，XA21胞内C端和WRKY62在细胞核中互作

3.XA21 kinase入核是介导植物免疫必需的

既然XA21的kinase被切割入核，它和XA21介导的植物免疫有什么关系吗？

和XA21-GFP株系比，XA21-GFP-NES转化株系的抗病性降低

4.XA21的胞内domain有一个有功能的NLS

预测XA21具有一个NLS

将NLS突变后，会抑制XA21的入核


【每周文献】R蛋白切割入核-2012-NC_第2张图片
R蛋白切割入核.png

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