KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin),即血蓝蛋白,是在某些软体动物、节肢动物(蜘蛛和甲壳虫)的血淋巴中发现的一种游离的蓝色呼吸色素。血蓝蛋白含两个直接连接多肽链的铜离子,与含铁的血红蛋白类似,它易于氧结合,也易与氧解离,是已知的惟一可与氧可逆结合的铜蛋白,氧化时呈青绿色,还原时呈白色。其分子量450 000~130 000。由于KLH比BSA有更高的免疫原性,因而是最常被选用的载体蛋白。
BSA (Bovine Serum Albumin),即牛血清白蛋白,属于最稳定的和可溶的白蛋白。其分子量为67 x 103 Da (含有59个Lys)。大约有30-35个主要氨基可用于与链接剂发生共轭反应, 使得BSA成为一种很流行的弱抗原化合物载体蛋白。
BSA的不利之处在于在很多实验中,它被当作封闭剂使用,如果多肽-BSA偶联物的抗血清用于这样的检测分析中,通常会出现假阳性,因为这些血清含有抗BSA的抗体。
蛋白偶联
KLH/BSA/Ovalbumin etc 偶联
小肽/半抗原必须耦合到载体蛋白(KLH,BSA,Ova),才可以获得高效的抗体。一般来说,多肽可以与蛋白偶联的条件如下:1 有一个自由的氨基或羧基2 半胱氨酸上的-SH也可以与载体蛋白偶联目前我公司提供高质量的偶联载体蛋白(KLH,BSA,OVA)
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