筛选鉴定与已经基因启动子相互作用的DNA结合蛋白-DNA Pull Down实验原理,技术流程

技术简介
DNA Pull Down是一种新颖的DNA-蛋白互作技术,能够鉴定与特定DNA序列结合的蛋白(转录因子或者DNA结合蛋白)。
DNA Pull Down使用生物素标记的DNA探针作为诱饵,与提取的内源细胞核蛋白进行孵育,捕获与DNA探针特异性结合的蛋白(比如转录因子),最终使用蛋白质谱的方法,鉴定出特异性结合的蛋白。

蓝景科信服务优势

  • 探针长度设计范围广
  • 蛋白提取自新鲜组织和细胞,保持天然构象
  • 特异性强,假阳性率低
  • 适用于真核生物和原核生物
  • 实验周期短,高通量,高灵敏度

DNA Pull Down原理图
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技术服务流程
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样本要求
1、新鲜组织样本
2、DNA探针序列
3、物种参考基因组信息

交付结果
1、DNA探针电泳图
2、探针标记效率结果
3、核蛋白银染结果
4、DNA Pull Down银染结果
5、质谱检测结果
6、DNA Pull Down结果分析报告
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图1. DNA探针电泳图

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图2. 生物素探针标记效率

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图3. 核蛋白银染

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图4. Pull Down后蛋白银染
Lane 1. 蛋白质分子量标准。Lane 2. 负对照。Lane 3和Lane 4. 同一个基因启动子区的两条探针Pull Down银染结果。

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图5. 色谱图

鉴定到的转录因子示例
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