鬼笔环肽-iFluor 488偶联物 样本实验方案

鬼笔环肽的特性是一个有用的工具，通过荧光类似物标记鬼笔环肽并用其染色肌动蛋白微丝进行光学显微镜观察，研究F-肌动蛋白在细胞中的分布。鬼笔环肽的荧光衍生物在活体或固定细胞中定位肌动蛋白丝以及在体外观察单个肌动蛋白丝方面非常有用。荧光鬼笔环肽衍生物已被用作高分辨率肌动蛋白网络研究的重要工具。

艾美捷 鬼笔环肽-iFluor 488偶联物摘要：

1.在微孔板中制备样品

2.从板中的样品中除去液体

3.在iFluor中添加Phalloidin™ 488共轭溶液（100μL/孔）

4.在室温下将细胞染色20至90分钟

5.清洗细胞

6.用FITC过滤器在显微镜下检查试样

鬼笔环肽-iFluor 488偶联物 样本实验方案（给细胞染色）：

1.进行甲醛固定。在室温下，用3.0–4.0%甲醛在PBS中培养细胞10–30分钟。

注意：避免使用任何含甲醇的固定剂，因为甲醇在固定过程中会破坏肌动蛋白。推荐的固定剂是不含甲醇的甲醛。

2.在PBS中冲洗固定电池2-3次。

3.可选：将PBS中的0.1%Triton X-100添加到固定电池中3至5分钟，以增加渗透性。在PBS中冲洗细胞2-3次。

4.添加100μL/孔（96孔板）的Phalloidin iFluor™ 488将工作溶液结合到固定电池中，并在室温下将电池染色20至90分钟。

5.用PBS轻轻冲洗细胞2至3次，以去除多余的phalloidin结合物，然后在显微镜下用FITC过滤器组进行电镀、密封和成像。

用鬼笔环肽  iFluor 488结合物（ATT Bioquest）对细胞进行染色。图像由麦吉尔的先进生物成像设备（ABIF）在蔡司激光扫描共焦显微镜上用63x/1.4NA物镜获取。显示的是19幅图像的zui大强度投影，Z方向间距为0.2 um。