如何把细胞培养的更好？

在细胞生物学实验中，细胞培养是最基本也是最关键的一步。因此为了保证实验的顺利进行，养好细胞就显得尤为重要。那如何才能保证细胞培养的质量呢？

细胞冻存及复苏

细胞冻存时，需要选取对数增长期的细胞（维持95%以上的活率最佳），而后根据说明书为每种细胞配制相应的冻存培养基，将细胞置于商业化的冻存盒后放入-80摄氏度冰箱中使其缓慢降温，24小时后转移到液氮罐中。细胞复苏是细胞培养的起始，与冻存过程完全不同，复苏过程需要快速完成，将细胞从液氮中拿出后，置于37摄氏度水中晃动，使其快速融化，而后将其转移到大体积已配好的培养基中离心去除冻存液，转入温热的培养基中。

血清

血清在解冻时，需要将其置于4℃冰箱中进行融化，以便减少沉淀的形成，为维持血清的品质，融化后需要进行分装，冷藏。并根据细胞的生长特性，血清可以直接加入培养基中使用，或对其进行灭活后使用（56℃，30分钟，并随时摇晃均匀）。

细胞培养基

培养基最好新鲜配制（维持一周左右的用量），否则放置时间过长会影响细胞培养基的品质，进而影响细胞状态。

细胞换液

根据细胞的生长特性，维持细胞处于合适的密度，一般两到三天进行换液。细胞培养基的颜色太黄，说明细胞密度过大，培养基已呈酸性，需要立即进行换液；若培养基偏紫，说明细胞密度较低或长势较差，此时可减少培养体积，增加细胞密度。

如何避免细胞污染？

在细胞培养过程中，最棘手也是最头疼的事情就是细胞污染，那细胞污染都有哪些类型？在我们的操作过程中，又需要如何避免细胞污染，保证细胞健康生长呢？

细胞污染的主要类型包括细菌、真菌及支原体污染。其中细菌和真菌污染由于会引起细胞培养基浑浊或出现大团菌丝的生长，可较易发现，并能及时处理。而支原体污染较难察觉，主要由于此类污染一般不会显著影响细胞培养基状态以及细胞的生长率，故而极易忽略，导致支原体污染对细胞的影响范围更广。那如何才能避免引起细胞的污染呢？

控制环境污染，保证细胞间的紫外灯可正常工作，每天可进行正常灭菌；

将需要使用到的材料提前置于超净台中摆好及紫外灭菌，以免在细胞处理过程中临时出入各种材料，增大细胞污染的风险；

细胞换液过程中，培养皿盖最好不要离开培养皿，且将需要的物品置于自己方便获取的位置；

在细胞培养期间，经常于显微镜下观察细胞，及时发现细胞可能出现的问题；并定期进行支原体污染检测，保证细胞处于正常且健康的状态。