CIDP---为sgRNA/guide RNA设计引物

基本过程是设计完sgRNA后需要将sgRNA插入到载体序列中，这个时候就涉及到了插入哪个位点的问题。因为同学们手中可能有各种各样的载体，所以在这里确实没有办法给同学们设置自动化的程序，所以做一个半自动化吧。如导图所示，选择酶切位点后，在这个切割位点两端会有序列（即红色与蓝色部分所示），将这些序列分别放入到下方的④和⑤的位置（不需要反向互补，程序会自动替你做）。然后，是输入sgRNA序列，依然有两种方式：一个是直接放入序列（①），一个是将前一个模块设计的结果或者自己从其他渠道获得的sgRNAs（从其他渠道获得的sgRNA，在整理的时候，一个sgRNA一行，不需要fasta格式），放入②，然后在③设置保存位置并命名文件，之后点击design即可设计。输入结果包括酶切位点序列（即输入的那段），sgRNA序列，加上Tm值。在将结果输入后，同样的结果也会显示在⑥。